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點(diǎn)擊次數(shù):16929 發(fā)布時(shí)間:2022/12/26 12:06:54
操作一、25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶染色
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將試劑盒里的染色液(Reagent E)從-20℃的冰箱里取出,放進(jìn)冰槽里等待溶化。然后移取 xx 毫升稀釋液(Reagent D)到 2 毫升離心管,加入 xx 微升染色液(Reagent E),混勻后,放進(jìn) 37℃恒溫2 水槽里預(yù)熱,標(biāo)記為染色工作液。然后進(jìn)行下列操作:
1. 小心抽去 25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)液
2. 小心加入 xx 毫升清理液(Reagent A),清洗生長(zhǎng)中的細(xì)胞表面
3. 小心抽去清理液
4. 小心加入 xx 毫升固定液(Reagent B),覆蓋整個(gè)生長(zhǎng)表面
5. 在室溫下孵育 5 分鐘
6. 小心抽去固定液
7. 小心加入 xx 毫升酸性液(Reagent C),清洗細(xì)胞表面
8. 小心抽去酸性液
9. 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟 7 和 8 一次
10.小心加入 xx 毫升染色工作液,覆蓋整個(gè)細(xì)胞表面
11.放進(jìn) 37℃培養(yǎng)箱,孵育 3 小時(shí)至 16 小時(shí),或細(xì)胞呈現(xiàn)藍(lán)色(注意:避免液體蒸發(fā))
12.在光學(xué)顯微鏡下觀察和計(jì)數(shù):表達(dá)衰老特異性β- 半乳糖苷酶的細(xì)胞為陽(yáng)性細(xì)胞,呈現(xiàn)藍(lán)色。
操作二、24 孔細(xì)胞培養(yǎng)板染色
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將試劑盒里的染色液(Reagent E)從-20℃的冰箱里取出,放進(jìn)冰槽里等待溶化。然后移取 xx 毫升稀釋液(Reagent D)到 15 毫升錐形離心管,加入 xx 微升染色液(Reagent E),混勻后,放進(jìn) 37℃ 恒溫水槽里預(yù)熱,標(biāo)記為染色工作液。然后進(jìn)行下列操作。
1.小心抽去 24 孔細(xì)胞培養(yǎng)板里的培養(yǎng)液
2.每孔加入 xx 微升清理液(Reagent A),清洗生長(zhǎng)中的細(xì)胞表面
3.小心抽去每孔里的清理液
4.每孔加入 xx 微升固定液(Reagent B),覆蓋整個(gè)生長(zhǎng)表面
5.在室溫下孵育 5 分鐘
6.小心抽去固定液
7.每孔加入 xx 微升酸性液(Reagent C),清洗細(xì)胞表面
8.小心抽去酸性液
9.重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟 7 和 8 一次
10.每孔加入 xx 微升染色工作液,覆蓋整個(gè)細(xì)胞表面
11.放進(jìn) 37℃培養(yǎng)箱,孵育 3 小時(shí)至 16 小時(shí),或細(xì)胞呈現(xiàn)藍(lán)色(注意:避免液體蒸發(fā))
12.在光學(xué)顯微鏡下觀察和計(jì)數(shù):表達(dá)衰老特異性β- 半乳糖苷酶的細(xì)胞為陽(yáng)性細(xì)胞,呈現(xiàn)藍(lán)色
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品為 100 次(4 個(gè) 24 孔板)或 20 次(20 個(gè) 25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶)操作
2. 操作時(shí),須戴手套
3. 本產(chǎn)品的參數(shù):固著劑種類和濃度、pH、生色底物的選擇和濃度等達(dá)到zui優(yōu)化
4. 使用時(shí),避免污染母液,否則出現(xiàn)絮狀沉淀,影響實(shí)驗(yàn)效果
5. 染色工作液避免光照
6. 細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性強(qiáng),孵育 3 小時(shí)即顯示陽(yáng)性;細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性弱,則需要孵育 24 小時(shí)
7. 細(xì)胞染色*長(zhǎng)孵育時(shí)間為 24 小時(shí)
8. 孵育時(shí)避免液體蒸發(fā)3
9. 本產(chǎn)品染色敏感,甚至對(duì)于微弱表達(dá)的酶活性仍然顯色清晰;用戶可以根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整孵育時(shí)間和染色工作液濃度,使染色恰到好處
10.細(xì)胞呈現(xiàn)藍(lán)色的部位為衰老細(xì)胞特異性β-半乳糖苷酶活性的地方
11.染色后的細(xì)胞樣品可以在 4℃冰箱里chang期保存,同樣須避免光照
12.本產(chǎn)品適合各種規(guī)格的培養(yǎng)細(xì)胞:載玻片,載玻片培養(yǎng)皿,35mm 培養(yǎng)皿,和各種培養(yǎng)孔板,須相應(yīng)調(diào)整處理液:
操作容器 建議處理液規(guī)格
載玻片 100 微升
載玻片培養(yǎng)皿 1 毫升
35mm 培養(yǎng)皿 1 毫升
96 孔培養(yǎng)板 100 微升
48 孔培養(yǎng)板 200 微升
24 孔培養(yǎng)板 500 微升
12 孔培養(yǎng)板 1 毫升
6 孔培養(yǎng)板 2 毫升
25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶 3 毫升
13.本公司提供系列細(xì)胞衰老分析試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定著色敏感
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
訂購(gòu)信息
編號(hào) 名稱 規(guī)格
G&VS10012.1 細(xì)胞衰老特異性β-半乳糖苷酶檢測(cè)試劑盒 100/250 次
G&VS10012.1A 清理液(Reagent A) 500 毫升
G&VS10012.1B 固定液(Reagent B) 500 毫升
G&VS10012.1C 酸性液(Reagent C) 500 毫升
G&VS10012.1D 稀釋液(Reagent D) 100 毫升
G&VS10012.1E 染色液(Reagent E) 50 毫升
產(chǎn)品編號(hào) 名稱 規(guī)格
G&VS10021 細(xì)胞周期流式細(xì)胞分析試劑盒 100 次
G&VS10033 BrdU 標(biāo)記法細(xì)胞繁殖流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒 10 次
G&VS10034.1 BrdU 標(biāo)記法載玻片細(xì)胞繁殖熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 10 次
G&VS10034.2 BrdU 標(biāo)記法組織冰凍切片細(xì)胞繁殖熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 10 次
G&VS10034.3 BrdU 標(biāo)記法組織石蠟切片細(xì)胞繁殖熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 10 次
G&VS10034.4 BrdU 標(biāo)記法載玻片細(xì)胞繁殖 NBT 顯色檢測(cè)試劑盒 10 次
G&VS10034.5 BrdU 標(biāo)記法組織冰凍切片細(xì)胞繁殖 NBT 顯色檢測(cè)試劑盒 10 次
G&VS10034.6 BrdU 標(biāo)記法組織石蠟切片細(xì)胞繁殖 NBT 顯色檢測(cè)試劑盒 10 次
G&VS10012.1 細(xì)胞衰老特異性β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒 100/250 次
G&VS10012.2 全組織衰老特異性β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒 10 次
G&VS10012.3 冰凍切片組織衰老特異性β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒 50 次
G&VS10012.4 通用型組織細(xì)胞衰老特異性β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒 10/100 次
G&VS80056.1 細(xì)胞衰老特異性脂褐素原位染色試劑盒 50 次
G&VS80056.2 全組織衰老特異性脂褐素原位染色試劑盒 10 次
G&VS80056.3 冰凍切片組織衰老特異性脂褐素原位染色試劑盒 50 次
G&VS80056.4 石蠟切片組織衰老特異性脂褐素原位染色試劑盒 50 次
G&VS30072 P16 蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 5 次
G&VS30073 P21 蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 5 次
G&VS20104 P16 基因表達(dá)北方雜交分析試劑盒 5 次
G&VS20105 P21 基因表達(dá)北方雜交分析試劑盒 5 次
G&VS20106.1 端粒酶活性 TRAP 電泳分析試劑盒 20 次
G&VS20106.2 端粒酶活性 TRAP 實(shí)時(shí)定量檢測(cè)試劑盒 20 次
G&VS20107 hTERT 表達(dá)實(shí)時(shí)定量檢測(cè)試劑盒 20 次
G&VS10037.1 細(xì)胞β-半乳糖苷酶化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒 20 次
G&VS10037.2 細(xì)胞β-半乳糖苷酶比色法定量檢測(cè)試劑盒 20 次
原創(chuàng)作者:上海極威生物科技有限公司
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