聯(lián) 系 人:段煜

電  話:15214379366

手  機(jī):16602115336

地  址:上海市崇明縣長興鎮(zhèn)潘園公路1800號2號樓9703室(上海泰和經(jīng)濟(jì)發(fā)展區(qū))

郵  編:201913

傳  真:021-80186165

郵  箱:435399850@qq.com

阿儀網(wǎng)商鋪:http://www.app17.com/c110001/

手機(jī)網(wǎng)站:m.jwswbio.com

技術(shù)文章

U87MG人惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞2022說明

點擊次數(shù):16927   發(fā)布時間:2022/12/26 13:02:00

 產(chǎn)品信息:T25細(xì)胞到貨處理

觀察

1、收到細(xì)胞后,請及時核對培養(yǎng)瓶上標(biāo)注的細(xì)胞名稱是否與訂購的細(xì)胞名稱一致以及培養(yǎng)瓶是否有破損或漏液等異常情況。

處理:

1、75%酒精棉球擦拭 T25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2、顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40x,100x,200x 各一張)前三天照片為重要售后依據(jù),不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。

3、不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞放入 37 度培養(yǎng)箱中靜置 3-4 小時后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

4、收到細(xì)胞后,及時查看說明書是貼壁細(xì)胞還是懸浮細(xì)胞形態(tài),并按常規(guī)貼壁或懸浮細(xì)胞的傳代方法操作。

 

貼壁:未超過 80%匯合度時,將瓶裝的wan培養(yǎng)液收集至離心管中,留 5ml wan培養(yǎng)基,放入 37℃、5%CO2 孵箱培養(yǎng);超過 80%匯合度時,根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。shou次傳代,建議 1:2 傳代(兩個 T25)。(傳代時建議一瓶用原瓶里面的wan培養(yǎng)基,另外一瓶用自己配的wan培養(yǎng)基,進(jìn)行對比培養(yǎng)。)

 

特殊細(xì)胞注意事項個別細(xì)胞貼壁不牢,在運輸過程中發(fā)生細(xì)胞脫落,這是正,F(xiàn)象。請將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm 離心 5min,收集上清(后期對比培養(yǎng)使用),沉淀加入胰酶 1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化 1-2 分鐘后,加 5ml wan培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心,棄上清,加 1-2ml wan培養(yǎng)基重懸。然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個 T25),補(bǔ)充新的wan培養(yǎng)基至 5-8ml/瓶,zui后放入 37,5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

(注意:如收到密封培養(yǎng)瓶,處理完后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)時要將培養(yǎng)瓶蓋子擰松)

 

產(chǎn)品名稱U87MG

產(chǎn)品貨號0162

中文名稱人惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞

基本形態(tài)上皮樣

培養(yǎng)條件DMEM+10%FBS

生長特性貼壁生長

消化時間1 分鐘左右

培養(yǎng)環(huán)境37℃,5%CO2,95%AIR

備注凍存細(xì)胞到貨處理

1、收到細(xì)胞后,檢查外包裝情況和箱內(nèi)是否還有干冰。如有外包裝破損干冰已wan揮發(fā)等問題,請即時聯(lián)系。

2、將細(xì)胞取出轉(zhuǎn)移至液氮或-80 度冰箱保存,建議盡早復(fù)蘇。

3復(fù)蘇第yi管如有活性狀態(tài)問題及時與我們聯(lián)系,會有技術(shù)人員與您溝通指導(dǎo)后再復(fù)蘇第二管。特別說明:未與我方聯(lián)系擅自復(fù)蘇第二管出現(xiàn)問題不予售后。

細(xì)胞復(fù)蘇

1、 從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用 75%的酒精擦拭凍存管外壁;

2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml wan培養(yǎng)基的 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

3、棄上清,沉淀用 5ml wan培養(yǎng)基重懸,接種 T25 培養(yǎng)瓶,于 37,5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4、第二天,換用新鮮wan培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

細(xì)胞傳代

1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 T25 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次:

2、添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入 5ml wan培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

3、棄上清,沉淀細(xì)胞用 1-2ml wan培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個 T25),補(bǔ)充新的wan培養(yǎng)基至 5-8ml/瓶,zui后放入 37,5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

細(xì)胞凍存

1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 T25 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;

2、添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入 5ml wan培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

3 棄上清,沉淀細(xì)胞加入 1ml/支的富衡無血清凍存液(GV7001),混勻后加入凍存管中。(如:凍一支,加入 1ml 無血清凍存液)

4、 將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可;如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中,需在-80℃冰箱存放 24 小時以上。

本庫的細(xì)胞系(株)僅用于科研工作。

原創(chuàng)作者:上海極威生物科技有限公司

首 頁| 公司介紹| 產(chǎn)品展示| 公司新聞| 榮譽(yù)證書| 資料下載| 技術(shù)文章| 聯(lián)系我們| 客戶留言

阿儀網(wǎng) 設(shè)計制作,未經(jīng)允許翻錄必究.   聯(lián)系人:段煜 聯(lián)系電話:15214379366 ICP備案號:滬ICP備15046135號-2 總訪問量:4101934 管理登錄

主營產(chǎn)品:ELISA試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品,細(xì)胞株,抗體,生物試劑,化學(xué)試劑,培養(yǎng)基,血清,實驗耗材,ABcam抗體,CST抗體,Santa抗體,ATCC細(xì)胞株,人elisa檢測試劑盒,小鼠elisa試劑盒,大鼠elisa試劑盒,牛elisa試劑盒,羊elisa試劑盒,豬elisa試劑盒,犬elisa試劑盒,植植物elisa試劑盒,elisa 檢測試劑盒報價,試劑盒批發(fā),免費代測elisa 試劑盒,細(xì)胞株供應(yīng)商,實驗外包

掃一掃,關(guān)注我們

9

阿儀網(wǎng)推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站

客戶服務(wù)熱線:

15214379366

16602115336

工作時間

8:30-18:30