ELISA背景深及全部呈有色原因是什么？

點(diǎn)擊次數(shù)：18919 發(fā)布時(shí)間：2016/5/17 8:21:45

　五月初，清華大學(xué)的楊老師在我司購買了3個(gè)elisa試劑盒，前段時(shí)間，楊老師反饋ELISA背景深，全部呈有色，問是什么原因？希望能得到技術(shù)老師的解答。我司陳技術(shù)有著6年的ELISA酶聯(lián)免疫法的操作經(jīng)驗(yàn)，有著豐富的實(shí)驗(yàn)經(jīng)歷，為楊老師解答了心中的疑問，深受楊老師的贊揚(yáng)！就楊老師的問題，我司陳技術(shù)做了以下分析：

ELISA實(shí)驗(yàn)中，背景深，全部呈有色（通常的Elisa背景值OD<0.2）

根據(jù)陳技術(shù)的分析，可能存在的原因有以下幾條：

1、ELISA實(shí)驗(yàn)可能原因：實(shí)驗(yàn)過程中洗滌不充分，洗后未拍干，樣品中其它成分殘留或酶標(biāo)記物殘留；

解決辦法：洗液準(zhǔn)確配制；充分洗滌，靜置15秒，徹底拍干。加樣或加酶拍板的濾紙應(yīng)棄去不用，不要反復(fù)使用，否則易造成污染。

2、ELISA實(shí)驗(yàn)可能原因之二：底物污染，未避光保存，出現(xiàn)顏色；

解決辦法：棄去底物，重新配置

3、ELISA實(shí)驗(yàn)可能原因之三：樣品稀釋液污染；

解決辦法：棄去稀釋液，重新配置

4、ELISA實(shí)驗(yàn)可能原因之四：吸頭重復(fù)使用，未洗凈或消毒不徹底；

解決辦法：吸頭盡可能一次性使用

5、ELISA實(shí)驗(yàn)可能原因之五：不正確的孵育時(shí)間，溫度（尤其是底物孵育的時(shí)間）；

解決辦法：*為常用的溫育溫度有37℃和室溫，其次是43℃和2～8℃。完全按照說明書要求