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兔瘟熱病毒抗體(DV-Ab)ELISA 檢測試劑盒-價格/說明書-極威生物

點擊次數(shù):17249   發(fā)布時間:2021/1/14 19:56:20

 

本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫(yī)學診斷
兔瘟熱病毒抗體(DV-Ab)ELISA 檢測試劑盒
使用說明書
檢測原理
試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被兔瘟熱病毒抗體(DV-Ab)捕獲抗原的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔瘟熱病毒抗體(DV-Ab)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),判斷樣品是否含有兔瘟熱病毒抗體(DV-Ab)。
兔瘟熱病毒抗體(DV-Ab)ELISA 檢測試劑盒-價格/說明書-GIVEI生物
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心 10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心 30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心 10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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自備物品
1. 酶標儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
操作注意事項
1. 試劑盒保存在 2-8℃,使用室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正,F(xiàn)象,水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 預處理后的樣本無需稀釋,直接取 10μL 加樣即可。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用充分搖勻。
試劑的準備
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按 1:20 稀釋,即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置 1min 后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板 5 次。
2. 自動洗板機:每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。
兔瘟熱病毒抗體(DV-Ab)ELISA 檢測試劑盒-價格/說明書-GIVEI生物
操作步驟
1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4℃。
2. 設置陰、陽性對照孔和樣本孔,陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各 50μL;
3. 待測樣本孔先加待測樣本 10μL,再加樣本稀釋液 40μL;
4. 隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗原100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板 5 次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
7. 每孔加入終止液 50μL,15min 內,在 450nm 波長處測定各孔的OD 值。

原創(chuàng)作者:上海極威生物科技有限公司

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