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點(diǎn)擊次數(shù)：17028 發(fā)布時(shí)間：2021/6/24 18:09:48
一、細(xì)胞P38激酶總活性光度法定量檢測(cè)試劑盒測(cè)定準(zhǔn)備
1．準(zhǔn)備好待測(cè)樣品（例如細(xì)胞裂解懸液等），置于冰槽里
2．設(shè)定好分光光度儀（溫度為30℃）：波長(zhǎng)為340nm，間隔1分鐘，讀數(shù)6次（共5分鐘），并置零
3．緩沖液（Reagent C）室溫下均衡溫度
二、背景對(duì)照測(cè)定
1．移取xx微升緩沖液（Reagent C）到新的比色皿
2．加入xx微升酶促液（Reagent D）
3．加入xx微升反應(yīng)液（Reagent E）
4．加入xx微升底物液（Reagent F）
5．放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘
6．加入xx微升陰性液（Reagent G）
7．上下傾倒數(shù)次，混勻（限定在3秒之內(nèi)）
8．即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)，此為背景空對(duì)照：340波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘 －340波長(zhǎng)讀數(shù)5分鐘
三、樣品總活性測(cè)定
1．移取xx微升緩沖液（Reagent C）到新的比色皿
2．加入xx微升酶促液（Reagent D）
3．加入xx微升反應(yīng)液（Reagent E）
4．加入xx微升底物液（Reagent F）
5．放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘
6．加入10微升待測(cè)樣品（注意：100微克細(xì)胞裂解蛋白；樣品須溶解）
7．上下傾倒數(shù)次，混勻（限定在3秒之內(nèi)）
8．即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)，此為樣品總活性讀數(shù)：340波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘 －340波長(zhǎng)讀數(shù)5分鐘
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