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點(diǎn)擊次數(shù)：16666 發(fā)布時(shí)間：2023/10/31 21:21:48
主要用途
體液氧化應(yīng)激活性氧（ROS）初級熒光測定試劑是一種旨在通過熒光染色劑二氯熒光乙酰乙酸鹽，受到活性氧的氧化下，產(chǎn)生熒光，來定量檢測活性氧族的生成和增加的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。可以被用于細(xì)胞凋亡、信號傳遞、衰老、代謝和營養(yǎng)學(xué)等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡易，性能穩(wěn)定。
技術(shù)背景
超氧自由基陰離子（superoxide radical；O2-）、過氧化氫（hydrogen peroxide；H2O2）、羥自由基或氫氧基（hydroxyl radical；OH-）、過氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氫過氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、過氧亞硝基陰離子（peroxynitrite anion；ONOO-）次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌自由基（semiqui radical）、單線態(tài)氧氣（singlet oxygen）等細(xì)胞內(nèi)活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的產(chǎn)生和增多，將導(dǎo)致細(xì)胞衰老或凋亡。活性氧特異性探針熒光染料2＇,7＇-二氯熒光乙酰乙酸鹽（2＇,7＇-dichlorofluorescein diacetate，DCFH-DA），一旦被過氧化氫、羥自由基或氫氧基、過氧化基、次氯酸等氧化，便產(chǎn)生熒光。據(jù)此測定活性氧族的濃度。
產(chǎn)品內(nèi)容
緩沖液（Reagent A） 毫升
染色液（Reagent B） 微升
稀釋液（Reagent C） 毫升
產(chǎn)品說明書1份
保存方式
保存染色液（Reagent B）在－20℃冰箱里，嚴(yán)格避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效bao證6月
用戶自備
抗凝管：用于采血儲存的容器
15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器
1.5毫升離心管：用于樣品操作和工作液配制的容器
培養(yǎng)箱：用于反應(yīng)孵育
（微型）臺式離心機(jī)：用于樣品操作
熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀：用于熒光定量分析
實(shí)驗(yàn)步驟
一、 樣品準(zhǔn)備
選擇一：血漿樣品
1． 準(zhǔn)備好抗凝管（注意：避免使用EDTA抗凝管）
2． 抽取1毫升血液，置于抗凝管里
3． 放進(jìn)4℃微型臺式離心機(jī)離心10分鐘，速度為700g（或3000RPM，例如eppendorf 5415）
4． 小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血漿成分（注意：避免觸碰白色液體層）
5． 即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)－70℃冰箱里保存
6． 移取10微升上述制備的血漿到新的1.5毫升離心管
7． 加入xx微升緩沖液（Reagent A），混勻
8． 放在冰槽里待測
選擇二：血清樣品
1．準(zhǔn)備好不含抗凝劑的儲存管
2． 抽取1毫升血液，置于儲存管里
3． 室溫下，靜置30分鐘，直至血液凝結(jié)
4． 放進(jìn)4℃微型臺式離心機(jī)離心15分鐘，速度為2000g（或5000RPM，例如eppendorf 5415）
5． 小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血清成分（注意：避免觸碰白色液體層）
6． 即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)－70℃冰箱里保存
7． 移取10微升上述制備的血清到新的1.5毫升離心管
8． 加入xx微升緩沖液（Reagent A），混勻
9． 放在冰槽里待測
選擇三：尿液/腦脊液/唾液/精液樣品
1． 準(zhǔn)備好1.5毫升離心管
2． 移取1毫升液體到離心管
3． 放進(jìn)4℃微型臺式離心機(jī)離心10分鐘，速度為700g（或3000RPM，例如eppendorf 5415）
4． 小心移取上清液到新的1.5毫升離心管
5． 即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)－70℃冰箱里保存
6． 移取10微升到新的1.5毫升離心管
7． 加入xx微升緩沖液（Reagent A），混勻
8． 放在冰槽里待測
選擇四：細(xì)胞培養(yǎng)上清
1． 準(zhǔn)備1瓶25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶的新鮮待測細(xì)胞
2． 小心移取細(xì)胞培養(yǎng)液到15毫升錐形離心管
3． 放進(jìn)4℃臺式離心機(jī)離心10分鐘，速度為300g
4． 小心移取上清液到新的15毫升錐形離心管
5． 移取10微升到新的1.5毫升離心管
6． 加入xx微升緩沖液（Reagent A），混勻
7． 放在冰槽里待測
8． 放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱里備用（1小時(shí)內(nèi)）
二、 樣品測定
實(shí)驗(yàn)開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的染色液（Reagent B）置入冰槽里融化，稀釋液（Reagent C）放進(jìn)37℃恒溫水槽里預(yù)熱。然后移出xx微升染色液（Reagent B）到新的1.5毫升離心管，加入xx微升稀釋液（Reagent C），混勻后，標(biāo)記為染色工作液，置入暗室里。然后進(jìn)行下列操作。
1． 準(zhǔn)備1個(gè)96孔板
2． 加入100微升上述制備的待測樣品
3． 加入xx微升染色工作液
4． 輕輕搖動(dòng)96孔板，混勻
5． 放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育20分鐘
6． 即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀檢測：（激發(fā)波長490nm，散發(fā)波長530nm）――RFU增高，表明活性氧族（ROS）含量高
注意事項(xiàng)
1． 本產(chǎn)品為50次操作
2． 操作時(shí)，須戴手套
3． 孵育時(shí)，避免光照
4． 測試前，細(xì)胞培養(yǎng)液須新鮮收集，1小時(shí)內(nèi)為zui佳
5． 培養(yǎng)液上清須澄清
6． 如果測定體系變化，則試劑用量相應(yīng)變化
7． 建議染色完成后，即刻進(jìn)行熒光分析
8． 用戶可以使用維生素E作為陰性對照
9． 本公司同時(shí)提供體液活性氧高質(zhì)熒光測定試劑盒（G&VS10016.11），滿足不同用戶需求
10． 本公司提供系列活性氧分析試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰
使用cheng諾
極威生物秉著“信譽(yù)至上、客戶滿意、質(zhì)量cheng諾”的宗旨為我們的用戶提供you質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)。用戶收到貨后，應(yīng)按照產(chǎn)品說明書上的規(guī)定妥善保管并在有效期內(nèi)使用。我們的產(chǎn)品在銷售前已作嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定，bao證說明書所述的使用效果。在貨到后10天內(nèi)若發(fā)現(xiàn)確屬本產(chǎn)品的質(zhì)量問題，請立即以書面形式（實(shí)驗(yàn)報(bào)告）與本公司聯(lián)系，并將該產(chǎn)品退回，經(jīng)檢驗(yàn)確系產(chǎn)品質(zhì)量所致，本公司負(fù)責(zé)更換產(chǎn)品。如系使用者錯(cuò)誤操作所致，本公司不承擔(dān)由此造成的損失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
訂購信息
編號名稱規(guī)格
G&VS10016.12體液氧化應(yīng)激活性氧（ROS）初級熒光測定試劑盒50次
G&VS10016.12A清理液（Reagent A）毫升
G&VS10016.12B 染色液（Reagent B）微升
G&VS10016.12C 稀釋液（Reagent C）毫升
| 產(chǎn)品編號 | 名稱 | 規(guī)格 |
| G&VS10016.12 | 細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧（ROS）高質(zhì)綠色熒光測定試劑盒 | 20次 |
| G&VS10016.2 | 細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧（ROS）初級綠色熒光測定試劑盒 | 100次 |
| G&VS10016.3 | 活體組織氧化應(yīng)激活性氧（ROS）高質(zhì)綠色熒光測定試劑盒 | 8/20次 |
| G&VS10016.4 | 活體組織氧化應(yīng)激活性氧（ROS）初級綠色熒光測定試劑盒 | 40/100次 |
| G&VS10016.5 | 冰凍切片氧化應(yīng)激活性氧（ROS）高質(zhì)綠色熒光測定試劑盒 | 50次 |
| G&VS10016.6 | 冰凍切片氧化應(yīng)激活性氧（ROS）初級綠色熒光測定試劑盒 | 50次 |
| G&VS10016.7 | 真菌/酵母細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧（ROS）高質(zhì)綠色熒光測定試劑盒 | 20次 |
| G&VS10016.8 | 真菌/酵母細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧（ROS）初級綠色熒光測定試劑盒 | 50次 |
| G&VS10016.9 | 植物細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧（ROS）高質(zhì)熒光測定試劑盒 | 20次 |
| G&VS10016.10 | 植物細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧（ROS）初級熒光測定試劑盒 | 50次 |
| G&VS10016.11 | 體液氧化應(yīng)激活性氧（ROS）高質(zhì)熒光測定試劑盒 | 50次 |
| G&VS10016.12 | 體液氧化應(yīng)激活性氧（ROS）初級熒光測定試劑盒 | 50次 |
原創(chuàng)作者：上海極威生物科技有限公司
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