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點(diǎn)擊次數(shù)：16670 發(fā)布時(shí)間：2023/11/6 21:15:12
主要用途
通用型細(xì)胞周期流式細(xì)胞分析試劑是一種旨在通過細(xì)胞流式儀測(cè)定細(xì)胞中DNA結(jié)合染料程度，來定量DNA含量，以進(jìn)一步獲取細(xì)胞周期分布狀況的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞（動(dòng)物、人體、植物、昆蟲等）的細(xì)胞周期分析�？梢员挥糜诩�(xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、細(xì)胞分裂、代謝等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，分辨率高，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。
技術(shù)背景
細(xì)胞周期是評(píng)價(jià)細(xì)胞代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。通過DNA結(jié)合染料，借助細(xì)胞流式儀，測(cè)定出DNA含量，根據(jù)DNA含量隨著細(xì)胞周期的不同而發(fā)生變化，來確定和區(qū)別細(xì)胞周期的不同階段。流式細(xì)胞術(shù)（FLOW CYTOMETRY）是七十年代發(fā)展起來的集計(jì)算機(jī)、激光、流體力學(xué)、細(xì)胞化學(xué)、細(xì)胞免疫學(xué)為一體的高科學(xué)技術(shù)。凋亡細(xì)胞是在正常G0/G1峰細(xì)胞群前出現(xiàn)亞二倍體峰（sub-G1）細(xì)胞群。
產(chǎn)品內(nèi)容
清理液（Reagent A） 毫升
裂解液（Reagent B） 毫升
染色液（Reagent C） 微升
去干擾劑（Reagent D） 毫升
保存液（Reagent E）毫升
產(chǎn)品說明書1份
保存方法
保存去干擾劑（Reagent D）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；染色液（Reagent C）避免光照，有效bao證6月
用戶自備
HANKS平衡鹽溶液（G&VS12022）或PBS緩沖溶液（G&VS12033）：用于清洗細(xì)胞
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（G&VS12024）：用于細(xì)胞脫離
wan全細(xì)胞培養(yǎng)液（G&VS12052）：用于中和胰蛋白酶的處理
15毫升錐形離心管：用于細(xì)胞收集的操作
1.5毫升離心管：用于細(xì)胞染色的容器
臺(tái)式離心機(jī)：用于細(xì)胞收集的操作
細(xì)胞流式儀：用于細(xì)胞熒光分析
實(shí)驗(yàn)步驟
實(shí)驗(yàn)開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的去干擾劑（Reagent D）置入冰槽里融化。移出xx微升裂解液（Reagent B）到新的1.5毫升離心管，加入xx微升染色液（Reagent C）和xx微升去干擾劑（Reagent D），混勻后標(biāo)記為1號(hào)工作液；再移出xx微升保存液（Reagent E）到新的1.5毫升離心管，加入xx微升染色液（Reagent C），混勻后標(biāo)記為2號(hào)工作液。工作液置于暗室里，避免光照。然后進(jìn)行下列操作。
1． 準(zhǔn)備1瓶25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶的待測(cè)細(xì)胞，鋪滿率達(dá)70％（約1百萬細(xì)胞數(shù)）
2． 小心移出細(xì)胞培養(yǎng)液到15毫升錐形離心管（收集漂浮細(xì)胞）
3． 加入2.5毫升用戶自備的HANKS平衡鹽溶液或PBS緩沖溶液到細(xì)胞培養(yǎng)瓶，覆蓋培養(yǎng)瓶表面
4． 小心移出2.5毫升清洗液到上述15毫升錐形離心管
5． 加入1毫升胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液到細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鋪滿整個(gè)培養(yǎng)平面
6． 置入37℃培養(yǎng)箱1分種
7． 振動(dòng)培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞脫落，然后加入5毫升用戶自備的wan全細(xì)胞培養(yǎng)液
8． 移入到上述15毫升錐形離心管（懸浮細(xì)胞從這一步驟開始）
9． 放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為300g
10． 小心抽去上清液
11． 加入xx毫升清理液（Reagent A）到15毫升錐形離心管，混勻
12． 放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為300g
13． 小心抽去上清液
14． 加入500微升1號(hào)工作液，用200微升槍頭上下輕柔抽吸，混勻細(xì)胞顆粒群（可以移入到1.5毫升離心管或細(xì)胞流式儀專用測(cè)試管）
15． 在暗室里室溫下孵育60分鐘
16． 加入500微升2號(hào)工作液，用200微升槍頭上下輕柔抽吸，混勻
17． 移入到細(xì)胞流式儀專用測(cè)試管（可放進(jìn)4℃冰箱里待測(cè)）
18． 即刻進(jìn)行細(xì)胞流式儀分析：波長488nm氬離子激光（或488nm激發(fā)波長，610nm散發(fā)波長），觀察50000個(gè)細(xì)胞以上
注意事項(xiàng)
1． 本產(chǎn)品為100次操作
2． 建議操作時(shí)，在無菌狀態(tài)下進(jìn)行
3． 確保實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性，須收集所有懸浮和貼壁細(xì)胞
4． 可用35mm培養(yǎng)皿或6孔培養(yǎng)板，細(xì)胞總量不得少于30萬
5． 操作時(shí)，須戴手套
6． 孵育時(shí)，必須避免光照
7． 建議細(xì)胞染色完成后，即刻進(jìn)行細(xì)胞流式儀分析。如果放進(jìn)4℃冰箱里待測(cè)，不要超過10天
8． 細(xì)胞流式儀分析前，須混勻內(nèi)容物
9． 細(xì)胞檢測(cè)量不得少于10000個(gè)
10． 告知流式儀技術(shù)員有關(guān)細(xì)胞類型
11． 本公司提供系列細(xì)胞周期分析試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰
使用cheng諾
極威生物秉著“信譽(yù)至上、客戶滿意、質(zhì)量cheng諾”的宗旨為我們的用戶提供you質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)。用戶收到貨后，應(yīng)按照產(chǎn)品說明書上的規(guī)定妥善保管并在有效期內(nèi)使用。我們的產(chǎn)品在銷售前已作嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定，bao證說明書所述的使用效果。在貨到后10天內(nèi)若發(fā)現(xiàn)確屬本產(chǎn)品的質(zhì)量問題，請(qǐng)立即以書面形式（實(shí)驗(yàn)報(bào)告）與本公司聯(lián)系，并將該產(chǎn)品退回，經(jīng)檢驗(yàn)確系產(chǎn)品質(zhì)量所致，本公司負(fù)責(zé)更換產(chǎn)品。如系使用者錯(cuò)誤操作所致，本公司不承擔(dān)由此造成的損失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
訂購信息
單組分訂購信息
編號(hào)名稱規(guī)格
G&VS10021.1通用型細(xì)胞周期流式細(xì)胞分析試劑盒100次
G&VS10021.1A清理液（Reagent A）毫升
G&VS10021.1B裂解液（Reagent B）毫升
G&VS10021.1C 染色液（Reagent C）毫升
G&VS10021.1D 抗干擾劑（Reagent D）毫升
G&VS10021.1E 保存液（Reagent E）毫升
G&VS12022 HANKS平衡鹽緩沖溶液毫升
G&VS12024胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液毫升
G&VS12033 PBS緩沖溶液毫升
G&VS12052 DMEMwan全細(xì)胞培養(yǎng)液毫升
試劑盒訂購信息
| 產(chǎn)品編號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 |
| G&VS10021.1 | 通用型細(xì)胞周期流式細(xì)胞分析試劑盒 | 100次 |
| G&VS10021.2 | 細(xì)胞周期藍(lán)色熒光流式細(xì)胞分析試劑盒（紫外波長，無需固定和透膜處理） | 100次 |
| G&VS10021.3 | 細(xì)胞周期碘化丙啶（PROPIDIUM IODIDE）紅色熒光流式細(xì)胞分析試劑盒 | 100次 |
| G&VS10137.1 | 雙參數(shù)細(xì)胞周期G0期流式細(xì)胞分析試劑盒 | 10次 |
| G&VS10137.2 | 雙參數(shù)細(xì)胞周期G1期流式細(xì)胞分析試劑盒 | 10次 |
| G&VS10137.3 | 雙參數(shù)細(xì)胞周期S期流式細(xì)胞分析試劑盒 | 10次 |
| G&VS10137.4 | 雙參數(shù)細(xì)胞周期G2期流式細(xì)胞分析試劑盒 | 10次 |
| G&VS10137.5 | 雙參數(shù)細(xì)胞周期M期流式細(xì)胞分析試劑盒 | 10次 |
| G&VS10137.6 | 多參數(shù)細(xì)胞周期全周期流式細(xì)胞分析試劑盒 | 10次 |
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