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技術(shù)文章

通用型細(xì)胞周期流式細(xì)胞分析試劑盒產(chǎn)品說明書

點(diǎn)擊次數(shù):16670   發(fā)布時(shí)間:2023/11/6 21:15:12

主要用途

通用型細(xì)胞周期流式細(xì)胞分析試劑是一種旨在通過細(xì)胞流式儀測(cè)定細(xì)胞中DNA結(jié)合染料程度,來定量DNA含量,以進(jìn)一步獲取細(xì)胞周期分布狀況的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞(動(dòng)物、人體、植物、昆蟲等)的細(xì)胞周期分析?梢员挥糜诩(xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、細(xì)胞分裂、代謝等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,分辨率高,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。

 

技術(shù)背景

細(xì)胞周期是評(píng)價(jià)細(xì)胞代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。通過DNA結(jié)合染料,借助細(xì)胞流式儀,測(cè)定出DNA含量,根據(jù)DNA含量隨著細(xì)胞周期的不同而發(fā)生變化,來確定和區(qū)別細(xì)胞周期的不同階段。流式細(xì)胞術(shù)(FLOW CYTOMETRY)是七十年代發(fā)展起來的集計(jì)算機(jī)、激光、流體力學(xué)、細(xì)胞化學(xué)、細(xì)胞免疫學(xué)為一體的高科學(xué)技術(shù)。凋亡細(xì)胞是在正常G0/G1峰細(xì)胞群前出現(xiàn)亞二倍體峰(sub-G1)細(xì)胞群。

 

產(chǎn)品內(nèi)容

清理液(Reagent A)    毫升

裂解液(Reagent B)    毫升

染色液(Reagent C)    微升

去干擾劑(Reagent D)    毫升

保存液(Reagent E)毫升

產(chǎn)品說明書1份

 

保存方法

保存去干擾劑(Reagent D)在-20冰箱里,其余的保存在4冰箱里;染色液(Reagent C)避免光照,有效bao6月

 

用戶自備

HANKS平衡鹽溶液(G&VS12022)或PBS緩沖溶液(G&VS12033):用于清洗細(xì)胞

胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(G&VS12024):用于細(xì)胞脫離

wan全細(xì)胞培養(yǎng)液(G&VS12052):用于中和胰蛋白酶的處理

15毫升錐形離心管:用于細(xì)胞收集的操作

1.5毫升離心管:用于細(xì)胞染色的容器

臺(tái)式離心機(jī):用于細(xì)胞收集的操作

細(xì)胞流式儀:用于細(xì)胞熒光分析

 

實(shí)驗(yàn)步驟

實(shí)驗(yàn)開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的去干擾劑(Reagent D)置入冰槽里融化。移出xx微升裂解液(Reagent B)到新的1.5毫升離心管,加入xx微升染色液(Reagent C)xx微升去干擾劑(Reagent D),混勻后標(biāo)記為1號(hào)工作液;再移出xx微升保存液(Reagent E)到新的1.5毫升離心管,加入xx微升染色液(Reagent C),混勻后標(biāo)記為2號(hào)工作液。工作液置于暗室里,避免光照。然后進(jìn)行下列操作。

 

1. 準(zhǔn)備1瓶25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶的待測(cè)細(xì)胞,鋪滿率達(dá)70%(約1百萬細(xì)胞數(shù))

2. 小心移出細(xì)胞培養(yǎng)液到15毫升錐形離心管(收集漂浮細(xì)胞)

3. 加入2.5毫升用戶自備的HANKS平衡鹽溶液或PBS緩沖溶液到細(xì)胞培養(yǎng)瓶,覆蓋培養(yǎng)瓶表面

4. 小心移出2.5毫升清洗液到上述15毫升錐形離心管

5. 加入1毫升胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液到細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鋪滿整個(gè)培養(yǎng)平面

6. 置入37培養(yǎng)箱1分種

7. 振動(dòng)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫落,然后加入5毫升用戶自備的wan細(xì)胞培養(yǎng)液

8. 移入到上述15毫升錐形離心管(懸浮細(xì)胞從這一步驟開始)

9. 放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為300g

10. 小心抽去上清液

11. 加入xx毫升清理液(Reagent A)15毫升錐形離心管混勻

12. 放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為300g

13. 小心抽去上清液

14. 加入500微升1號(hào)工作液,用200微升槍頭上下輕柔抽吸,混勻細(xì)胞顆粒群(可以移入到1.5毫升離心管或細(xì)胞流式儀專用測(cè)試管)

15. 在暗室里室溫下孵育60分鐘

16. 加入500微升2號(hào)工作液,用200微升槍頭上下輕柔抽吸,混勻

17. 移入到細(xì)胞流式儀專用測(cè)試管(可放進(jìn)4℃冰箱里待測(cè))

18. 即刻進(jìn)行細(xì)胞流式儀分析:波長488nm氬離子激光(或488nm激發(fā)波長,610nm散發(fā)波長),觀察50000個(gè)細(xì)胞以上

 

注意事項(xiàng)

1. 本產(chǎn)品為100次操作

2. 建議操作時(shí),在無菌狀態(tài)下進(jìn)行

3. 確保實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性,須收集所有懸浮和貼壁細(xì)胞

4. 可用35mm培養(yǎng)皿或6孔培養(yǎng)板,細(xì)胞總量不得少于30萬

5. 操作時(shí),須戴手套

6. 孵育時(shí),必須避免光照

7. 建議細(xì)胞染色完成后,即刻進(jìn)行細(xì)胞流式儀分析。如果放進(jìn)4℃冰箱里待測(cè),不要超過10天

8. 細(xì)胞流式儀分析前,須混勻內(nèi)容物

9. 細(xì)胞檢測(cè)量不得少于10000個(gè)

10. 告知流式儀技術(shù)員有關(guān)細(xì)胞類型

11. 本公司提供系列細(xì)胞周期分析試劑產(chǎn)品

 

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定

2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰

 

使用cheng

極威生物秉著“信譽(yù)至上、客戶滿意、質(zhì)量cheng”的宗旨為我們的用戶提供you質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)。用戶收到貨后,應(yīng)按照產(chǎn)品說明書上的規(guī)定妥善保管并在有效期內(nèi)使用。我們的產(chǎn)品在銷售前已作嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定,bao說明書所述的使用效果。在貨到后10天內(nèi)若發(fā)現(xiàn)確屬本產(chǎn)品的質(zhì)量問題,請(qǐng)立即以書面形式(實(shí)驗(yàn)報(bào)告)與本公司聯(lián)系,并將該產(chǎn)品退回,經(jīng)檢驗(yàn)確系產(chǎn)品質(zhì)量所致,本公司負(fù)責(zé)更換產(chǎn)品。如系使用者錯(cuò)誤操作所致,本公司不承擔(dān)由此造成的損失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

 

訂購信息

單組分訂購信息

編號(hào)名稱規(guī)格

G&VS10021.1通用型細(xì)胞周期流式細(xì)胞分析試劑盒100次

G&VS10021.1A清理液(Reagent A)毫升

G&VS10021.1B裂解液(Reagent B)毫升

G&VS10021.1C 染色液(Reagent C)毫升

G&VS10021.1D 抗干擾劑(Reagent D)毫升

G&VS10021.1E 保存液(Reagent E)毫升

G&VS12022 HANKS平衡鹽緩沖溶液毫升

G&VS12024胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液毫升

G&VS12033 PBS緩沖溶液毫升

G&VS12052 DMEMwan細(xì)胞培養(yǎng)液毫升

 

試劑盒訂購信息

產(chǎn)品編號(hào)

名稱

規(guī)格

G&VS10021.1

通用型細(xì)胞周期流式細(xì)胞分析試劑盒

100次

G&VS10021.2

細(xì)胞周期藍(lán)色熒光流式細(xì)胞分析試劑盒(紫外波長,無需固定和透膜處理)

100次

G&VS10021.3

細(xì)胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)紅色熒光流式細(xì)胞分析試劑盒

100次

G&VS10137.1

雙參數(shù)細(xì)胞周期G0期流式細(xì)胞分析試劑盒

10次

G&VS10137.2

雙參數(shù)細(xì)胞周期G1期流式細(xì)胞分析試劑盒

10次

G&VS10137.3

雙參數(shù)細(xì)胞周期S期流式細(xì)胞分析試劑盒

10次

G&VS10137.4

雙參數(shù)細(xì)胞周期G2期流式細(xì)胞分析試劑盒

10次

G&VS10137.5

雙參數(shù)細(xì)胞周期M期流式細(xì)胞分析試劑盒

10次

G&VS10137.6

多參數(shù)細(xì)胞周期全周期流式細(xì)胞分析試劑盒

10次

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