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技術(shù)文章

真菌/酵母細(xì)胞樣品細(xì)胞周期SYTOX綠色熒光流式細(xì)胞分析試劑盒產(chǎn)品說明書

點(diǎn)擊次數(shù):16661   發(fā)布時(shí)間:2023/11/6 21:18:29

 主要用途

 

真菌/酵母細(xì)胞樣品細(xì)胞周期SYTOX綠色熒光流式細(xì)胞分析試劑是一種旨在通過細(xì)胞流式儀測(cè)定真菌/酵母細(xì)胞中DNA結(jié)合SYTOX綠色染料程度,來定量DNA含量,以進(jìn)一步獲取細(xì)胞周期分布狀況的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種真菌/酵母細(xì)胞,包括芽殖酵母、裂殖酵母等的細(xì)胞周期分析。可以被用于細(xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、細(xì)胞分裂、代謝等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,分辨率高,操作簡捷,性能穩(wěn)定。

 

技術(shù)背景

 

芽殖酵母(Saccharomyces cerevisiae)、裂殖酵母(Schizosacchromyces pombe)是研究真核生物細(xì)胞周期的模式生物。細(xì)胞周期是評(píng)價(jià)細(xì)胞代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。通過DNA結(jié)合染料,借助細(xì)胞流式儀,測(cè)定出DNA含量,根據(jù)DNA含量隨著細(xì)胞周期的不同而發(fā)生變化,來確定和區(qū)別細(xì)胞周期的不同階段。流式細(xì)胞術(shù)(FLOW CYTOMETRY)是七十年代發(fā)展起來的集計(jì)算機(jī)、激光、流體力學(xué)、細(xì)胞化學(xué)、細(xì)胞免疫學(xué)為一體的高科學(xué)技術(shù)。凋亡細(xì)胞是在正常G0/G1峰細(xì)胞群前出現(xiàn)亞二倍體峰(sub-G1)細(xì)胞群。SYTOX綠色染料具有不受細(xì)胞數(shù)量變化、染料濃度變化、細(xì)胞形態(tài)和大小變化,以及細(xì)胞培養(yǎng)液不同等影響,且不易滲漏等優(yōu)點(diǎn)。

 

產(chǎn)品內(nèi)容

 

清理液(Reagent A    毫升

固著液(Reagent B    毫升

抗干擾液(Reagent C    毫升

酶解液(Reagent D    毫升

染色液(Reagent E    毫升

產(chǎn)品說明書    1

 

保存方法

 

保存抗干擾液(Reagent C、酶解液(Reagent D)和染色液(Reagent E)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;染色液(Reagent E避免光照,有效bao6

 

用戶自備

 

15毫升錐形離心管:用于樣品操作的容器

2毫升離心管:用于細(xì)胞染色的容器

(微型)臺(tái)式離心機(jī):用于樣品操作操作

培養(yǎng)箱或恒溫水槽:用于反應(yīng)孵育

細(xì)胞流式儀:用于細(xì)胞熒光分析

實(shí)驗(yàn)步驟

 

1. 準(zhǔn)備5 X 106的待測(cè)真菌/酵母細(xì)胞 

2. 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心1分鐘,速度為16000g

3. 小心抽去上清液

4. 加入xx毫升清理液(Reagent A15毫升錐形離心管,混勻

5. 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心1分鐘,速度為16000g 

6. 小心抽去上清液

7. 緩慢加入xx毫升預(yù)冷的固著液(Reagent B,且渦旋震蕩混勻

8. 放進(jìn)4℃冰箱里孵育16小時(shí)

9. 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心1分鐘,速度為16000g 

10. 小心抽去固著液

11. 加入xx毫升清理液(Reagent A15毫升錐形離心管,混勻

12. 移入到2毫升離心管

13. 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心1分鐘,速度為16000g

14. 重復(fù)清洗一次

15. 加入xx抗干擾液(Reagent C,混勻

16. 放進(jìn)37恒溫水槽,孵育216小時(shí)

17. 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心1分鐘,速度為16000g

18. 加入xx酶解液(Reagent D混勻

19. 放進(jìn)37恒溫水槽,孵育20分鐘

20. 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心1分鐘,速度為16000g

21. 加入xx清理液(Reagent A,混勻

22. 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心1分鐘,速度為16000g 

23. 小心抽去上清液

24. 加入xx微升染色液Reagent D,混勻細(xì)胞顆粒群

25. 超聲處理100瓦,30%功率,15

26. 在暗室里37培養(yǎng)箱里孵育30分鐘

27. 移入到細(xì)胞流式儀專用測(cè)試管(可放進(jìn)4℃冰箱里待測(cè))

28. 即刻進(jìn)行細(xì)胞流式儀分析:波長488nm氬離子激光出現(xiàn)色熒光(或488nm激發(fā)波長,530nm散發(fā)波長)觀察50000個(gè)細(xì)胞以上

 

注意事項(xiàng)

 

1. 本產(chǎn)品為50次操作

2. 操作時(shí),須戴手套

3. 孵育時(shí),必須避免光照

4. 建議細(xì)胞染色完成后,即刻進(jìn)行細(xì)胞流式儀分析。如果放進(jìn)4℃冰箱里待測(cè),不要超過1

5. 細(xì)胞流式儀分析前,須混勻內(nèi)容物,或超聲處理,避免細(xì)胞成團(tuán)

6. 細(xì)胞檢測(cè)量不得少于10000個(gè)

7. 告知流式儀技術(shù)員有關(guān)細(xì)胞類型

8. 使用未經(jīng)染色的細(xì)胞進(jìn)行FSCSSC設(shè)定,然后將染色細(xì)胞調(diào)整到未經(jīng)染色細(xì)胞的水平,包括FL1、FL2FL3PMT

9. 建議設(shè)定:

Detector FSC E00  Gain2

Detector FL1-A Voltage400  Gain4

流速:500/

10. 本公司提供系列細(xì)胞周期分析試劑產(chǎn)品

 

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

 

1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定

2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰

 

使用cheng

 

極威生物秉著信譽(yù)至上、客戶滿意、質(zhì)量cheng的宗旨為我們的用戶提供you質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)。用戶收到貨后,應(yīng)按照產(chǎn)品說明書上的規(guī)定妥善保管并在有效期內(nèi)使用。我們的產(chǎn)品在銷售前已作嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定,bao說明書所述的使用效果。在貨到后10天內(nèi)若發(fā)現(xiàn)確屬本產(chǎn)品的質(zhì)量問題,請(qǐng)立即以書面形式(實(shí)驗(yàn)報(bào)告)與本公司聯(lián)系,并將該產(chǎn)品退回,經(jīng)檢驗(yàn)確系產(chǎn)品質(zhì)量所致,本公司負(fù)責(zé)更換產(chǎn)品。如系使用者錯(cuò)誤操作所致,本公司不承擔(dān)由此造成的損失。

 

友情提醒

 

IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

 

訂購信息

 

單組分訂購信息

 

編號(hào)名稱規(guī)格

G&VS10021.5     真菌/酵母細(xì)胞樣品細(xì)胞周期SYTOX綠色熒光流式細(xì)胞分析試劑盒50

G&VS10021.5A 清理液(Reagent A毫升

G&VS10021.5B 固著液(Reagent B毫升

G&VS10021.5C 抗干擾液(Reagent C毫升

G&VS10021.5D 酶解液(Reagent D毫升

G&VS10021.5E 染色液(Reagent E毫升

 

試劑盒訂購信息

 

產(chǎn)品編號(hào)

名稱

規(guī)格

G&VS10021.1

通用型細(xì)胞周期流式細(xì)胞分析試劑盒

100

G&VS10021.2

細(xì)胞周期藍(lán)色熒光流式細(xì)胞分析試劑盒(紫外波長,無需固定和透膜處理)

100

G&VS10021.3

細(xì)胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)紅色熒光流式細(xì)胞分析試劑盒

100

G&VS10021.4

真菌/酵母細(xì)胞樣品細(xì)胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)紅色熒光流式細(xì)胞分析試劑盒

50

G&VS10021.5

真菌/酵母細(xì)胞樣品細(xì)胞周期SYTOX綠色熒光流式細(xì)胞分析試劑盒

50

原創(chuàng)作者:上海極威生物科技有限公司

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