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點(diǎn)擊次數(shù)：16661 發(fā)布時(shí)間：2023/11/6 21:18:29
主要用途
真菌/酵母細(xì)胞樣品細(xì)胞周期SYTOX綠色熒光流式細(xì)胞分析試劑是一種旨在通過細(xì)胞流式儀測(cè)定真菌/酵母細(xì)胞中DNA結(jié)合SYTOX綠色染料程度，來定量DNA含量，以進(jìn)一步獲取細(xì)胞周期分布狀況的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種真菌/酵母細(xì)胞，包括芽殖酵母、裂殖酵母等的細(xì)胞周期分析。可以被用于細(xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、細(xì)胞分裂、代謝等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，分辨率高，操作簡捷，性能穩(wěn)定。
技術(shù)背景
芽殖酵母（Saccharomyces cerevisiae）、裂殖酵母（Schizosacchromyces pombe）是研究真核生物細(xì)胞周期的模式生物。細(xì)胞周期是評(píng)價(jià)細(xì)胞代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。通過DNA結(jié)合染料，借助細(xì)胞流式儀，測(cè)定出DNA含量，根據(jù)DNA含量隨著細(xì)胞周期的不同而發(fā)生變化，來確定和區(qū)別細(xì)胞周期的不同階段。流式細(xì)胞術(shù)（FLOW CYTOMETRY）是七十年代發(fā)展起來的集計(jì)算機(jī)、激光、流體力學(xué)、細(xì)胞化學(xué)、細(xì)胞免疫學(xué)為一體的高科學(xué)技術(shù)。凋亡細(xì)胞是在正常G0/G1峰細(xì)胞群前出現(xiàn)亞二倍體峰（sub-G1）細(xì)胞群。SYTOX綠色染料具有不受細(xì)胞數(shù)量變化、染料濃度變化、細(xì)胞形態(tài)和大小變化，以及細(xì)胞培養(yǎng)液不同等影響，且不易滲漏等優(yōu)點(diǎn)。
產(chǎn)品內(nèi)容
清理液（Reagent A） 毫升
固著液（Reagent B） 毫升
抗干擾液（Reagent C） 毫升
酶解液（Reagent D） 毫升
染色液（Reagent E） 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方法
保存抗干擾液（Reagent C）、酶解液（Reagent D）和染色液（Reagent E）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；染色液（Reagent E）避免光照，有效bao證6月
用戶自備
15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器
2毫升離心管：用于細(xì)胞染色的容器
（微型）臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品操作操作
培養(yǎng)箱或恒溫水槽：用于反應(yīng)孵育
細(xì)胞流式儀：用于細(xì)胞熒光分析
實(shí)驗(yàn)步驟
1． 準(zhǔn)備好5 X 106的待測(cè)真菌/酵母細(xì)胞
2． 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心1分鐘，速度為16000g
3． 小心抽去上清液
4． 加入xx毫升清理液（Reagent A）到15毫升錐形離心管，混勻
5． 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心1分鐘，速度為16000g
6． 小心抽去上清液
7． 緩慢加入xx毫升預(yù)冷的固著液（Reagent B），且渦旋震蕩混勻
8． 放進(jìn)4℃冰箱里孵育16小時(shí)
9． 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心1分鐘，速度為16000g
10． 小心抽去固著液
11． 加入xx毫升清理液（Reagent A）到15毫升錐形離心管，混勻
12． 移入到2毫升離心管
13． 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心1分鐘，速度為16000g
14． 重復(fù)清洗一次
15． 加入xx微升抗干擾液（Reagent C），混勻
16． 放進(jìn)37℃恒溫水槽，孵育2至16小時(shí)
17． 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心1分鐘，速度為16000g
18． 加入xx微升酶解液（Reagent D），混勻
19． 放進(jìn)37℃恒溫水槽，孵育20分鐘
20． 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心1分鐘，速度為16000g
21． 加入xx微升清理液（Reagent A），混勻
22． 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心1分鐘，速度為16000g
23． 小心抽去上清液
24． 加入xx微升染色液（Reagent D），混勻細(xì)胞顆粒群
25． 超聲處理100瓦，30%功率，15秒
26． 在暗室里37℃培養(yǎng)箱里孵育30分鐘
27． 移入到細(xì)胞流式儀專用測(cè)試管（可放進(jìn)4℃冰箱里待測(cè)）
28． 即刻進(jìn)行細(xì)胞流式儀分析：波長488nm氬離子激光出現(xiàn)綠色熒光（或488nm激發(fā)波長，530nm散發(fā)波長），觀察50000個(gè)細(xì)胞以上
注意事項(xiàng)
1． 本產(chǎn)品為50次操作
2． 操作時(shí)，須戴手套
3． 孵育時(shí)，必須避免光照
4． 建議細(xì)胞染色完成后，即刻進(jìn)行細(xì)胞流式儀分析。如果放進(jìn)4℃冰箱里待測(cè)，不要超過1周
5． 細(xì)胞流式儀分析前，須混勻內(nèi)容物，或超聲處理，避免細(xì)胞成團(tuán)
6． 細(xì)胞檢測(cè)量不得少于10000個(gè)
7． 告知流式儀技術(shù)員有關(guān)細(xì)胞類型
8． 使用未經(jīng)染色的細(xì)胞進(jìn)行FSC與SSC設(shè)定，然后將染色細(xì)胞調(diào)整到未經(jīng)染色細(xì)胞的水平，包括FL1、FL2、FL3的PMT
9． 建議設(shè)定：
Detector FSC E00 Gain：2
Detector FL1-A Voltage：400 Gain：4
流速：500/秒
10． 本公司提供系列細(xì)胞周期分析試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰
使用cheng諾
極威生物秉著“信譽(yù)至上、客戶滿意、質(zhì)量cheng諾”的宗旨為我們的用戶提供you質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)。用戶收到貨后，應(yīng)按照產(chǎn)品說明書上的規(guī)定妥善保管并在有效期內(nèi)使用。我們的產(chǎn)品在銷售前已作嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定，bao證說明書所述的使用效果。在貨到后10天內(nèi)若發(fā)現(xiàn)確屬本產(chǎn)品的質(zhì)量問題，請(qǐng)立即以書面形式（實(shí)驗(yàn)報(bào)告）與本公司聯(lián)系，并將該產(chǎn)品退回，經(jīng)檢驗(yàn)確系產(chǎn)品質(zhì)量所致，本公司負(fù)責(zé)更換產(chǎn)品。如系使用者錯(cuò)誤操作所致，本公司不承擔(dān)由此造成的損失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
訂購信息
單組分訂購信息
編號(hào)名稱規(guī)格
G&VS10021.5 真菌/酵母細(xì)胞樣品細(xì)胞周期SYTOX綠色熒光流式細(xì)胞分析試劑盒50次
G&VS10021.5A 清理液（Reagent A）毫升
G&VS10021.5B 固著液（Reagent B）毫升
G&VS10021.5C 抗干擾液（Reagent C）毫升
G&VS10021.5D 酶解液（Reagent D）毫升
G&VS10021.5E 染色液（Reagent E）毫升
試劑盒訂購信息
| 產(chǎn)品編號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 |
| G&VS10021.1 | 通用型細(xì)胞周期流式細(xì)胞分析試劑盒 | 100次 |
| G&VS10021.2 | 細(xì)胞周期藍(lán)色熒光流式細(xì)胞分析試劑盒（紫外波長，無需固定和透膜處理） | 100次 |
| G&VS10021.3 | 細(xì)胞周期碘化丙啶（PROPIDIUM IODIDE）紅色熒光流式細(xì)胞分析試劑盒 | 100次 |
| G&VS10021.4 | 真菌/酵母細(xì)胞樣品細(xì)胞周期碘化丙啶（PROPIDIUM IODIDE）紅色熒光流式細(xì)胞分析試劑盒 | 50次 |
| G&VS10021.5 | 真菌/酵母細(xì)胞樣品細(xì)胞周期SYTOX綠色熒光流式細(xì)胞分析試劑盒 | 50次 |
原創(chuàng)作者：上海極威生物科技有限公司
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