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技術(shù)文章

細(xì)胞周期流式細(xì)胞分析試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)

點(diǎn)擊次數(shù):16678   發(fā)布時(shí)間:2023/11/6 21:26:56

 要用途

 

細(xì)胞周期流式細(xì)胞分析試劑是一種旨在通過細(xì)胞流式儀測定細(xì)胞中DNA 結(jié)合染料程度, 來定量 DNA 含量,以進(jìn)一步獲取細(xì)胞周期分布狀況的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、 成功實(shí)驗(yàn)證明的。其用于各種細(xì)胞(動(dòng)物、人體、植物、昆蟲等) 的細(xì)胞周期分析。可以被用于細(xì)胞凋 亡、信號傳遞、細(xì)胞分裂、代謝等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,分辨率高,操作簡捷,性能穩(wěn)定。

術(shù)背景

 

細(xì)胞周期是評價(jià)細(xì)胞代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。通過 DNA  結(jié)合染料,借助細(xì)胞流式儀,測定出 DNA 含量,根據(jù) DNA 含量隨著細(xì)胞周期的不同而發(fā)生變化,來確定和區(qū)別細(xì)胞周期的不同階段。流式細(xì) 胞術(shù)(FLOW CYTOMETRY) 是七十年代發(fā)展起來的集計(jì)算機(jī)、激光、流體力學(xué)、細(xì)胞化學(xué)、細(xì)胞免疫學(xué) 為一體的高科學(xué)技術(shù)。

 


產(chǎn)品內(nèi)容

 

清理液(Reagent A)

裂解液(Reagent B)

染色液(Reagent C)

去干擾劑(Reagent D)

保存液(Reagent E)

產(chǎn)品說明書

 

保存 干擾劑(Reagent D)在-20℃冰箱里,其余的保存在 4℃冰箱里; 染色液(Reagent C) 光照,有效bao 12 月

用戶自備

 

HANKS 平衡鹽溶液(G&VS12022)或 PBS 緩沖溶液(G&VS12033):用于清洗細(xì)胞

胰蛋白酶乙二胺四乙混合液(G&VS12024):用于細(xì)胞脫離

wan全細(xì)胞培養(yǎng)液(G&VS12052):用于中和胰蛋白酶的處

毫升錐形離心管:用于細(xì)胞收集的操作

毫升離心管:用于細(xì)胞染色的容器

臺式離心機(jī):用于細(xì)胞收集的操作

細(xì)胞流式儀:用于細(xì)胞熒光分析


實(shí)驗(yàn)步驟

 

實(shí)驗(yàn)開始前, 將-20℃冰箱里的試劑盒中的 去干擾劑(Reagent D) 置入冰槽里融化。移出XXX微裂解液(Reagent  B) 到新的 1.5 毫升離心管,加入XXX微升 染色液(Reagent C)XXX微升 去干擾劑(Reagent D),混勻后標(biāo)記為 1 號工作液;再移出XXX微升 保存(Reagent E) 到新的XXX毫升離心管,加入 4 微升染色液(Reagent C),混勻后標(biāo)記為 2 工作液。工作液置于暗室里,避免光照。然后進(jìn)行下列操作。

 

1.準(zhǔn)XXXXXXcm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶的待測細(xì)胞,鋪滿率達(dá) 70%(約 1 百萬細(xì)胞數(shù))

2.小心移出細(xì)胞培養(yǎng)液到XXX毫升錐形離心管(收集漂浮細(xì)胞)

3加入XXX毫升用戶自備的 HANKS 平衡鹽溶液或 PBS 緩沖溶液到細(xì)胞培養(yǎng)瓶,覆蓋培養(yǎng)瓶表面

4.心移出XXX毫升清洗液到上述 15 毫升錐形離心管

5.加入XXX毫升胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液到細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鋪滿整個(gè)培養(yǎng)平面

6置入XXX℃培養(yǎng)箱XXX分種

7.振動(dòng)培養(yǎng)瓶,使細(xì)脫落,然后加入XXX毫升用戶自備的wan細(xì)胞培養(yǎng)液

8.移入到上述XXX毫升錐形離心管(懸浮細(xì)胞從這一步驟開始)

9放進(jìn)臺式離心機(jī)離心XXX鐘,速度為XXXg

10.小心抽去上清

11.加入XXX毫升 清理液(Reagent A) 到 15 毫升錐形離心管,混勻

12.放進(jìn)臺式離心機(jī)離XXX分鐘,速度為XXXg

13.小心抽去上清

14.加入XXX微升 1 號工作液,用XXX微升槍頭上下輕柔抽吸, 混勻細(xì)胞顆粒群(可以移入到XXX升離心管或細(xì)胞流式儀專用測試管)

15.在暗室里室溫下孵育XXX分鐘

16.加入XXX微升XXX號工作液,用XXX微升槍頭上下輕柔抽吸,混勻

17.移入到細(xì)胞流式儀專用測試管(可放進(jìn) 4℃冰箱里待測)

18.即刻進(jìn)行細(xì)胞流式儀分析: 波長XXXnm 氬離子激光, 觀察XXX個(gè)細(xì)胞以上

 

注意事項(xiàng)

1本產(chǎn)品為 100 次操作

2.所有操作均須無菌狀態(tài)下進(jìn)

3確保實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性,須收集所有懸浮和貼壁細(xì)胞

4.可用 35mm 培養(yǎng)皿或 6 孔培養(yǎng)板,細(xì)胞總量不得少于 30 萬

5操作時(shí),須戴手套

6.孵育時(shí),必須避免光照

7 建議細(xì)胞染色完成后,即刻進(jìn)行細(xì)胞流式儀分析。如果放進(jìn) 4℃冰箱里待測,不要超過 10

8 細(xì)胞流式儀分析前,須混勻內(nèi)容物

9 細(xì)胞檢測量不得少于 10000 個(gè)

10.告知流式儀技術(shù)員有關(guān)細(xì)胞類型

11.本公司提供細(xì)胞流式儀分析外包服務(wù)

12.本公司提供系列細(xì)胞凋亡試劑產(chǎn)品


質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能chang穩(wěn)定

2 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光顯色清晰

 

使用cheng

極威生物秉著“信譽(yù)至上、客戶滿意、質(zhì)量承”的宗旨為我們的用戶提供you質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)。用戶收到貨 后,應(yīng)按照產(chǎn)品說明書上的規(guī)定妥善保管并在有效期內(nèi)使用。我們的產(chǎn)品在銷售前已作嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定, bao說明書所的使用效果。在貨到后 10 天內(nèi)若發(fā)現(xiàn)確屬本產(chǎn)品的質(zhì)量問題, 請立即以書面形式(實(shí)驗(yàn)報(bào) )與本司聯(lián)系, 并將該產(chǎn)品退回, 經(jīng)檢驗(yàn)確系產(chǎn)品質(zhì)量所致, 本公司負(fù)責(zé)更換產(chǎn)品。如系使用者錯(cuò)誤 操作所致,本公司不承擔(dān)由此造成的損失。

情提醒

IF IT DOESN’T WORK,  RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

 

產(chǎn)品編號

名稱

規(guī)格

G&VS10016.1

細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測定試劑盒

20 次

G&VS10016.2

細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)初級熒光測定試劑盒

100 次

G&VS10017

線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測定試劑盒

20 次

G&VS10021

細(xì)胞周期流式細(xì)胞分析試劑盒

100 次

G&VS10022.1

細(xì) TUNEL 測定試劑盒

10 次

G&VS10022.2

凍切片 TUNEL 測定試劑盒

10 次

G&VS10022.3

蠟切片 TUNEL 測定試劑盒

10 次

G&VS10063.1

細(xì) KUNEL 測定試劑盒

10 次

G&VS10063.2

凍切片 KUNEL 測定試劑盒

10 次

G&VS10063.3

蠟切片 KUNEL 測定試劑盒

10 次

G&VS10023.1

HOECHST 33342 細(xì)胞核形態(tài)染色試劑盒

100 次

 

G&VS10023.2

PROPIDIUM IODIDE 細(xì)胞核形態(tài)染色試劑盒

50 次

G&VS10023.3

CHROMOMYCIN A3 細(xì)胞核形態(tài)染色試劑盒

50 次

G&VS10064

HOECHST 33342 和 PROPIDIUM IODIDE 細(xì)胞膜變檢測試劑盒

50 次

G&VS10032

TUNEL 流式細(xì)胞儀分析試劑盒

10 次

 

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