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技術(shù)文章

細(xì)胞周期碘化丙啶紅色熒光流式細(xì)胞分析試劑盒產(chǎn)品說明書

點(diǎn)擊次數(shù):16680   發(fā)布時(shí)間:2023/11/6 21:28:45

 主要用途

細(xì)胞周期碘化丙啶PROPIDIUM IODIDE)紅色熒光流式細(xì)胞分析試劑是一種旨在通過細(xì)胞流式儀測定細(xì)胞中DNA結(jié)合碘化丙啶染料程度,來定量DNA含量,以進(jìn)一步獲取細(xì)胞周期分布狀況的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞(動(dòng)物、人體、植物、昆蟲等)的細(xì)胞周期分析。可以被用于細(xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、細(xì)胞分裂、代謝等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,分辨率高,操作簡捷,性能穩(wěn)定。

 

技術(shù)背景

細(xì)胞周期是評(píng)價(jià)細(xì)胞代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。通過DNA結(jié)合染料,借助細(xì)胞流式儀,測定出DNA含量,根據(jù)DNA含量隨著細(xì)胞周期的不同而發(fā)生變化,來確定和區(qū)別細(xì)胞周期的不同階段。流式細(xì)胞術(shù)(FLOW CYTOMETRY)是七十年代發(fā)展起來的集計(jì)算機(jī)、激光、流體力學(xué)、細(xì)胞化學(xué)、細(xì)胞免疫學(xué)為一體的高科學(xué)技術(shù)。凋亡細(xì)胞是在正常G0/G1峰細(xì)胞群前出現(xiàn)亞二倍體峰(subG1)細(xì)胞群。

 

產(chǎn)品內(nèi)容

清理液(Reagent A     毫升

固著液(Reagent B     毫升

緩沖液(Reagent C     毫升

染色液(Reagent D     毫升

產(chǎn)品說明書1

 

保存方法

保存緩沖液(Reagent C)和染色液(Reagent D在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;染色液(Reagent D,有效bao6月

 

用戶自備

HANKS平衡鹽溶液(G&VS12022)或PBS緩沖溶液(G&VS12033):用于清洗細(xì)胞

胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(G&VS12024):用于細(xì)胞脫離

wan全細(xì)胞培養(yǎng)液(G&VS12052):用于中和胰蛋白酶的處理

15毫升錐形離心管:用于細(xì)胞收集的操作

1.5毫升離心管:用于細(xì)胞染色的容器

(微型)臺(tái)式離心機(jī):用于細(xì)胞收集的操作

細(xì)胞流式儀:用于細(xì)胞熒光分析

 

實(shí)驗(yàn)步驟

實(shí)驗(yàn)開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的試劑置入冰槽里融化。移出xx微升緩沖液(Reagent C到新的1.5毫升離心管,加入xx微升染色液(Reagent D混勻后標(biāo)記為色工作液,置于暗室里,避免光照。然后進(jìn)行下列操作。

1. 準(zhǔn)備125cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶的待測細(xì)胞,鋪滿率達(dá)70%(約1百萬細(xì)胞數(shù))

2. 小心移出細(xì)胞培養(yǎng)液到15毫升錐形離心管(收集漂浮細(xì)胞)

3. 加入2.5毫升用戶自備的HANKS衡鹽溶液或PBS緩沖溶液到細(xì)胞培養(yǎng)瓶,覆蓋培養(yǎng)瓶表面

4. 小心移出2.5毫升清洗液到上述15毫升錐形離心管

5. 加入1毫升胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液到細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鋪滿整個(gè)培養(yǎng)平面

6. 置入37培養(yǎng)箱孵育1分種

7. 振動(dòng)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫落,然后加入5毫升用戶自備的wan細(xì)胞培養(yǎng)液

8. 移入到上述15毫升錐形離心管(懸浮細(xì)胞從這一步驟開始)

9. 放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為300g

10. 小心抽去上清液

11. 加入xx毫升預(yù)冷的清理液(Reagent A15毫升錐形離心管,混勻

12. 移入到1.5毫升離心管

13. 放進(jìn)4微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為500g2000RPM,例如EPPENDORF 5415

14. 小心抽去上清液

15. 加入xx毫升預(yù)冷的固著液(Reagent B混勻

16. 放進(jìn)4℃冰箱里孵育16小時(shí)

17. 放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為500g2000RPM,例如EPPENDORF 5415

18. 小心抽去固著液

19. 加入xx微升染色工作液,用200微升槍頭上下輕柔抽吸,混勻細(xì)胞顆粒群

20. 在暗室里37培養(yǎng)箱里孵育45分鐘

21. 移入到細(xì)胞流式儀專用測試管(可放進(jìn)4冰箱里待測)

22. 即刻進(jìn)行細(xì)胞流式儀分析:波長488nm氬離子激光出現(xiàn)紅色熒光(或488nm激發(fā)波長,610nm散發(fā)波長,觀察50000個(gè)細(xì)胞以上

 

注意事項(xiàng)

1. 本產(chǎn)品為50次操作

2. 確保實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性,須收集所有懸浮和貼壁細(xì)胞

3. 可用35mm培養(yǎng)皿或6孔培養(yǎng)板,細(xì)胞總量不得少于30

4. 操作時(shí),須戴手套

5. 孵育時(shí),必須避免光照

6. 建議細(xì)胞染色完成后,即刻進(jìn)行細(xì)胞流式儀分析。如果放進(jìn)4冰箱里待測,不要超過1

7. 細(xì)胞流式儀分析前,須混勻內(nèi)容物,避免細(xì)胞成團(tuán)

8. 細(xì)胞檢測量不得少于10000個(gè)

9. 告知流式儀技術(shù)員有關(guān)細(xì)胞類型

10. 本公司提供系列細(xì)胞周期分析試劑產(chǎn)品

 

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定

2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰

 

使用cheng

極威生物秉著信譽(yù)至上、客戶滿意、質(zhì)量cheng的宗旨為我們的用戶提供you質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)。用戶收到貨后,應(yīng)按照產(chǎn)品說明書上的規(guī)定妥善保管并在有效期內(nèi)使用。我們的產(chǎn)品在銷售前已作嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定,bao說明書所述的使用效果。在貨到后10天內(nèi)若發(fā)現(xiàn)確屬本產(chǎn)品的質(zhì)量問題,請立即以書面形式(實(shí)驗(yàn)報(bào)告)與本公司聯(lián)系,并將該產(chǎn)品退回,經(jīng)檢驗(yàn)確系產(chǎn)品質(zhì)量所致,本公司負(fù)責(zé)更換產(chǎn)品。如系使用者錯(cuò)誤操作所致,本公司不承擔(dān)由此造成的損失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

 

訂購信息

編號(hào)名稱規(guī)格

G&VS10021.3細(xì)胞周期碘化丙啶色熒光流式細(xì)胞分析試劑50

G&VS10021.3A清理液(Reagent A500毫升

G&VS10021.3B固著液(Reagent B500毫升

G&VS10021.3C 緩沖液(Reagent C100毫升

G&VS10021.3D 染色液(Reagent D10毫升

G&VS12022 HANKS平衡鹽緩沖溶液500毫升

G&VS12024胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液100毫升

G&VS12033 PBS緩沖溶液500毫升

G&VS12052 DMEM完quan細(xì)胞培養(yǎng)液500毫升

產(chǎn)品編號(hào)

名稱

規(guī)格

G&VS10021.1

通用型細(xì)胞周期流式細(xì)胞分析試劑盒

100次

G&VS10021.2

細(xì)胞周期藍(lán)色熒光流式細(xì)胞分析試劑盒(紫外波長,無需固定和透膜處理)

100次

G&VS10021.3

細(xì)胞周期碘化丙啶PROPIDIUM IODIDE)紅色熒光流式細(xì)胞分析試劑盒

100次

G&VS10137.1

雙參數(shù)細(xì)胞周期G0期流式細(xì)胞分析試劑盒

10次

G&VS10137.2

雙參數(shù)細(xì)胞周期G1期流式細(xì)胞分析試劑盒

10次

G&VS10137.3

雙參數(shù)細(xì)胞周期S期流式細(xì)胞分析試劑盒

10次

G&VS10137.4

雙參數(shù)細(xì)胞周期G2期流式細(xì)胞分析試劑盒

10次

G&VS10137.5

雙參數(shù)細(xì)胞周期M期流式細(xì)胞分析試劑盒

10次

G&VS10137.6

多參數(shù)細(xì)胞周期全周期流式細(xì)胞分析試劑盒

10次

G&VS10138.1

通用型動(dòng)物細(xì)胞周期G1/SG2/M期)同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10138.2

動(dòng)物細(xì)胞周期G0同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10138.3

動(dòng)物細(xì)胞周期G1同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10138.4

動(dòng)物細(xì)胞周期G1后期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10138.5

動(dòng)物細(xì)胞周期S早期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10138.6

動(dòng)物細(xì)胞周期S同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10138.7

動(dòng)物細(xì)胞周期S后期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10138.8

動(dòng)物細(xì)胞周期G2同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10138.9

動(dòng)物細(xì)胞周期M同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10140.1

通用型植物樣品細(xì)胞周期G1/SG2/M同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10140.2

植物細(xì)胞周期G0同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10140.3

植物細(xì)胞周期G1同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10140.4

植物細(xì)胞周期G1后期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10140.5

植物細(xì)胞周期S早期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10140.6

植物細(xì)胞周期S同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10140.7

植物細(xì)胞周期S后期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10140.8

植物細(xì)胞周期G2同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10140.9

植物細(xì)胞周期M同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10141.1

通用型酵母樣品細(xì)胞周期G1/SG2/M同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10141.2

酵母細(xì)胞周期G0同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10141.3

酵母細(xì)胞周期G1同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10141.4

酵母細(xì)胞周期G1后期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10141.5

酵母細(xì)胞周期S早期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10141.6

酵母細(xì)胞周期S同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10141.7

酵母細(xì)胞周期S后期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10141.8

酵母細(xì)胞周期G2同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10141.9

酵母細(xì)胞周期M同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

10次

G&VS10142

通用型細(xì)胞周期同步(SYNCHRONY細(xì)胞流式分析試劑盒

20次

原創(chuàng)作者:上海極威生物科技有限公司

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