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點擊次數(shù):16686 發(fā)布時間:2023/11/6 21:30:28
主要用途
真菌/酵母細胞樣品細胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)紅色熒光流式細胞分析試劑是一種旨在通過細胞流式儀測定真菌/酵母細胞中DNA結(jié)合碘化丙啶染料程度,來定量DNA含量,以進一步獲取細胞周期分布狀況的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種真菌/酵母細胞,包括芽殖酵母、裂殖酵母等的細胞周期分析?梢员挥糜诩毎蛲觥⑿盘杺遞、細胞分裂、代謝等的研究。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,分辨率高,操作簡捷,性能穩(wěn)定。
技術(shù)背景
芽殖酵母(Saccharomyces cerevisiae)、裂殖酵母(Schizosacchromyces pombe)是研究真核生物細胞周期的模式生物。細胞周期是評價細胞代謝、生理和病理狀況的重要指標。通過DNA結(jié)合染料,借助細胞流式儀,測定出DNA含量,根據(jù)DNA含量隨著細胞周期的不同而發(fā)生變化,來確定和區(qū)別細胞周期的不同階段。流式細胞術(shù)(FLOW CYTOMETRY)是七十年代發(fā)展起來的集計算機、激光、流體力學(xué)、細胞化學(xué)、細胞免疫學(xué)為一體的高科學(xué)技術(shù)。凋亡細胞是在正常G0/G1峰細胞群前出現(xiàn)亞二倍體峰(sub-G1)細胞群。
產(chǎn)品內(nèi)容
清理液(Reagent A) 毫升
固著液(Reagent B) 毫升
抗干擾液(Reagent C) 毫升
酶解液(Reagent D) 毫升
染色液(Reagent E) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方法
保存抗干擾液(Reagent C)、酶解液(Reagent D)和染色液(Reagent E)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;染色液(Reagent E)避免光照,有效bao證6月
用戶自備
15毫升錐形離心管:用于樣品操作的容器
2毫升離心管:用于細胞染色的容器
(微型)臺式離心機:用于樣品操作操作
培養(yǎng)箱或恒溫水槽:用于反應(yīng)孵育
細胞流式儀:用于細胞熒光分析
實驗步驟
1. 準備好5 X 106的待測真菌/酵母細胞
2. 放進微型臺式離心機離心1分鐘,速度為16000g
3. 小心抽去上清液
4. 加入xx毫升清理液(Reagent A)到15毫升錐形離心管,混勻
5. 放進微型臺式離心機離心1分鐘,速度為16000g
6. 小心抽去上清液
7. 緩慢加入xx毫升預(yù)冷的固著液(Reagent B),且渦旋震蕩混勻
8. 放進4℃冰箱里孵育16小時
9. 放進微型臺式離心機離心1分鐘,速度為16000g
10. 小心抽去固著液
11. 加入xx毫升清理液(Reagent A)到15毫升錐形離心管,混勻
12. 移入到2毫升離心管
13. 放進微型臺式離心機離心1分鐘,速度為16000g
14. 重復(fù)清洗一次
15. 加入xx微升抗干擾液(Reagent C),混勻
16. 放進37℃恒溫水槽,孵育2至16小時
17. 放進微型臺式離心機離心1分鐘,速度為16000g
18. 加入xx微升酶解液(Reagent D),混勻
19. 放進37℃恒溫水槽,孵育20分鐘
20. 放進微型臺式離心機離心1分鐘,速度為16000g
21. 加入xx微升清理液(Reagent A),混勻
22. 放進微型臺式離心機離心1分鐘,速度為16000g
23. 小心抽去上清液
24. 加入xx微升染色液(Reagent D),混勻細胞顆粒群
25. 超聲處理100瓦,30%功率,15秒
26. 在暗室里37℃培養(yǎng)箱里孵育30分鐘
27. 移入到細胞流式儀專用測試管(可放進4℃冰箱里待測)
28. 即刻進行細胞流式儀分析:波長488nm氬離子激光出現(xiàn)紅色熒光(或488nm激發(fā)波長,610nm散發(fā)波長),觀察50000個細胞以上
注意事項
1. 本產(chǎn)品為50次操作
2. 操作時,須戴手套
3. 孵育時,必須避免光照
4. 建議細胞染色完成后,即刻進行細胞流式儀分析。如果放進4℃冰箱里待測,不要超過1周
5. 細胞流式儀分析前,須混勻內(nèi)容物,或超聲處理,避免細胞成團
6. 細胞檢測量不得少于10000個
7. 告知流式儀技術(shù)員有關(guān)細胞類型
8. 使用未經(jīng)染色的細胞進行FSC與SSC設(shè)定,然后將染色細胞調(diào)整到未經(jīng)染色細胞的水平,包括FL1、FL2、FL3的PMT
9. 建議設(shè)定:
Detector FSC E00 Gain:3
Detector FL2-A Voltage:890 Gain:2
流速:500/秒
10. 本公司提供系列細胞周期分析試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標準
1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰
使用cheng諾
極威生物秉著“信譽至上、客戶滿意、質(zhì)量cheng諾”的宗旨為我們的用戶提供you質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)。用戶收到貨后,應(yīng)按照產(chǎn)品說明書上的規(guī)定妥善保管并在有效期內(nèi)使用。我們的產(chǎn)品在銷售前已作嚴格的質(zhì)量鑒定,bao證說明書所述的使用效果。在貨到后10天內(nèi)若發(fā)現(xiàn)確屬本產(chǎn)品的質(zhì)量問題,請立即以書面形式(實驗報告)與本公司聯(lián)系,并將該產(chǎn)品退回,經(jīng)檢驗確系產(chǎn)品質(zhì)量所致,本公司負責更換產(chǎn)品。如系使用者錯誤操作所致,本公司不承擔由此造成的損失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
訂購信息
單組分訂購信息
編號名稱規(guī)格
G&VS10021.4真菌/酵母細胞樣品細胞周期碘化丙啶紅色熒光流式細胞分析試劑盒50次
G&VS10021.4A清理液(Reagent A)毫升
G&VS10021.4B固著液(Reagent B)毫升
G&VS10021.4C 抗干擾液(Reagent C)毫升
G&VS10021.4D 酶解液(Reagent D)毫升
G&VS10021.4E 染色液(Reagent E)毫升
試劑盒訂購信息
產(chǎn)品編號 | 名稱 | 規(guī)格 |
G&VS10021.1 | 通用型細胞周期流式細胞分析試劑盒 | 100次 |
G&VS10021.2 | 細胞周期藍色熒光流式細胞分析試劑盒(紫外波長,無需固定和透膜處理) | 100次 |
G&VS10021.3 | 細胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)紅色熒光流式細胞分析試劑盒 | 100次 |
G&VS10021.4 | 真菌/酵母細胞樣品細胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)紅色熒光流式細胞分析試劑盒 | 50次 |
G&VS10021.5 | 真菌/酵母細胞樣品細胞周期SYTOX綠色熒光流式細胞分析試劑盒 | 50次 |
原創(chuàng)作者:上海極威生物科技有限公司
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