聯(lián) 系 人：段煜
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點擊次數(shù)：16658 發(fā)布時間：2024/2/5 9:47:46
主要用途
冰凍切片組織TUNEL熒光測定試劑是一種旨在使用標準化的化學方法，包括固著、封阻、通透等完整步驟，從存檔中的冰凍組織切片中探尋DNA斷點，即運用修飾過的核苷酸，在末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶（TdT）的幫助下，對DNA單鏈或雙鏈上斷點處的3’末端進行熒光素標記，原位探測和定量分析單細胞水平的DNA降解狀況的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。主要適用于冰凍組織切片的DNA降解測定。廣泛用于細胞凋亡的研究。產(chǎn)品嚴格無菌，即到即用，反應(yīng)敏感，操作簡捷，性能穩(wěn)定。
技術(shù)背景
細胞凋亡，或細胞程序性死亡，在諸如形態(tài)發(fā)育、免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)、以及腫瘤和神經(jīng)退行性疾病等各種生物學過程中，起著實質(zhì)性的作用。凋亡細胞具有形態(tài)、生化、和分子方面的顯著特征。其中內(nèi)源性核酸酶的激活，將DNA鏈在核小體間連接區(qū)切成缺口，使核內(nèi)DNA斷裂成小片斷。在組織細胞原位DNA切口處可被末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶（TdT）標記上生物素dUTP，即TUNEL（Terminal deoxynucleotidyl Transferase Biotin-dUTP Nick End Labeling），然后通過與熒光素綴合卵白素（FITC conjugated avidin）的反應(yīng)，顯示綠色熒光（激發(fā)波長488nm， 散發(fā)波長530nm）。
產(chǎn)品內(nèi)容
清理液（Reagent A） 毫升
固著液（Reagent B） 毫升
封阻液（Reagent C） 微升
酶標液（Reagent D） 微升
熒光液（Reagent E） 微升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存封阻液（Reagent C）、酶標液（Reagent D）和熒光液（Reagent E）在－20℃冰箱里，嚴格避免反復(fù)凍融，其余的保存在4℃冰箱里；熒光液（Reagent E），避免光照；有效bao證6月
用戶自備
小型染色缸：用于切片的清洗操作
（共聚焦）熒光顯微鏡：用于細胞染色后觀察分析
特別注意
1． 酶標液（Reagent D）不能在室溫下凍融，而必須在冰槽里凍融，凍融后即刻使用；嚴禁反復(fù)凍融；考慮分裝，以備下次使用
2． 熒光液（Reagent E）避免光照
3． 每次移取試劑，須更換槍頭，以免污染母液，影響結(jié)果
實驗步驟
一、樣品預(yù)處理
1． 取出10片待測的冰凍組織切片
2． 室溫下，小心加上xx微升清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿樣品表面
3． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
4． 小心加上xx微升固著液（Reagent B），鋪滿整個樣品表面
5． 室溫下孵育30分鐘
6． 小心移去切片上的固著液（Reagent B）
7． 室溫下，將切片置入xx毫升清理液（Reagent A）中，孵育2分鐘
8． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
9． 小心加上xx微升封阻液（Reagent C），鋪滿整個樣品表面
10． 室溫下孵育30分鐘
11． 室溫下，將切片置入xx毫升清理液（Reagent A）中，孵育5分鐘
12． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
二、斷點標記處理
1． 小心加上xx微升酶標液（Reagent D），鋪滿整個切片樣品表面
2． 在37℃濕潤的培養(yǎng)箱里，孵育1小時，保持濕潤，避免干燥
3． 小心移去切片上的酶標液（Reagent D）
4． 室溫下，小心將切片置入xx毫升清理液（Reagent A）中孵育2分鐘
5． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
三、樣本染色處理
1． 小心加上xx微升熒光液（Reagent E）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
2． 室溫下孵育30分鐘，避免光照
3． 小心移去切片上的熒光液（Reagent E）
4． 室溫下，小心將切片置入xx毫升清理液（Reagent A）中孵育2分鐘
5． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
6． 放上蓋玻片或封片
7． 即刻在（共聚焦）熒光顯微鏡下（激發(fā)波長488nm， 散發(fā)波長530nm）觀察：陽性細胞呈現(xiàn)綠色熒光
注意事項
1． 本產(chǎn)品為10次操作
2． 操作時，須戴手套
3． 封阻液（Reagent C）達到100％封閉效果，超過雙氧水封閉效果
4． 酶標液（Reagent D）嚴禁反復(fù)凍融
5． 清理液（Reagent A）50毫升置于小型染色缸里，可重復(fù)使用
6． 所有操作在室溫下進行，除操作中規(guī)定之外
7． 每次更換試劑溶液時，保持樣品表面基本晾干：可以使用餐巾綿紙吸干或槍頭抽掉
8． 試劑溶液在樣品表面時，避免有氣泡存在，同時確保鋪滿樣品表面
9． 染色完成后，即刻進行熒光顯微鏡觀察
10． 本公司提供系列細胞凋亡試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標準
1． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰
使用cheng諾
極威生物秉著“信譽至上、客戶滿意、質(zhì)量cheng諾”的宗旨為我們的用戶提供you質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)。用戶收到貨后，應(yīng)按照產(chǎn)品說明書上的規(guī)定妥善保管并在有效期內(nèi)使用。我們的產(chǎn)品在銷售前已作嚴格的質(zhì)量鑒定，bao證說明書所述的使用效果。在貨到后10天內(nèi)若發(fā)現(xiàn)確屬本產(chǎn)品的質(zhì)量問題，請立即以書面形式（實驗報告）與本公司聯(lián)系，并將該產(chǎn)品退回，經(jīng)檢驗確系產(chǎn)品質(zhì)量所致，本公司負責更換產(chǎn)品。如系使用者錯誤操作所致，本公司不承擔由此造成的損失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
訂購信息
單組分訂購信息
編號 名稱 規(guī)格
G&VS10022.5 冰凍切片組織TUNEL熒光測定試劑盒 10/20次
G&VS10022.5A 清理液（Reagent A） 毫升
G&VS10022.5B 固著液（Reagent B） 毫升
G&VS10022.5C 封阻液（Reagent C） 毫升
G&VS10022.5D 酶標液（Reagent D） 毫升
G&VS10022.5E 熒光液（Reagent E） 毫升
試劑盒訂購信息
| 產(chǎn)品編號 | 名稱 | 規(guī)格 |
| G&VS10022.1 | 細胞TUNEL顯色法（DAB）測定試劑盒 | 10/20次 |
| G&VS10022.2 | 冰凍切片TUNEL顯色法（DAB）測定試劑盒 | 10次 |
| G&VS10022.3 | 石蠟切片TUNEL顯色法（DAB）測定試劑盒 | 10次 |
| G&VS10022.4 | 細胞TUNEL熒光法（Fluorescein）測定試劑盒 | 10次 |
| G&VS10022.5 | 冰凍切片TUNEL熒光法（Fluorescein）測定試劑盒 | 10次 |
| G&VS10022.6 | 石蠟切片TUNEL熒光法（Fluorescein）測定試劑盒 | 10次 |
| G&VS10022.7 | 細胞TUNEL比色法定量檢測試劑盒 | 10/50次 |
原創(chuàng)作者：上海極威生物科技有限公司
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