聯(lián) 系 人:段煜
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3. 預(yù)處理后的樣本無需稀釋,直接取 10 μ L 加樣即可。
4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
試劑盒組成
名稱 | 96 孔配置 | 48 孔配置 | 備注 |
微孔酶標(biāo)板 | 12 孔×8 條 | 12 孔×4 條 | 無 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3mL | 0.3mL | 無 |
樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
檢測(cè)抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進(jìn)行稀釋 |
底物 A | 6mL | 3mL | 無 |
底物 B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2 張 | 2 張 | 無 |
說明書 | 1 份 | 1 份 | 無 |
自封袋 | 1 個(gè) | 1 個(gè) | 無 |
注:標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為: 8、4 、2 、 1、0.5 、0 U/mL.
試劑的準(zhǔn)備
20×洗滌緩沖液的稀釋: 蒸餾水按 1: 20 稀釋, 即 1 份的 20×洗滌 緩沖液加 19 份的蒸餾水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置 1min 后甩盡 孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板 5 次。
2. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。
操作步驟
1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條, 剩余板條用自封 袋密封放回 4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 50 μ L;
3. 待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本 10μL,再加樣本稀釋液 40 μ L;
4. 隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記 的檢測(cè)抗體 100 μ L ,用封板膜封住反應(yīng)孔, 37℃水浴鍋或恒溫箱溫 育 60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干, 每孔加滿洗滌液,靜置 1min,甩去 洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板 5 次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物 A 、 B 各 50 μ L, 37℃避光孵育 15min。
7. 每孔加入終止液 50 μ L, 15min 內(nèi), 在 450nm 波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的 OD 值。
結(jié)果判斷
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線: 在 Excel 工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng) OD 值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線, 按曲線方程計(jì)算各樣
本濃度值。
試劑盒性能
1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù) R 值,大于等于 0.9900。
2. 靈敏度:檢測(cè)濃度小于 0.1 U/mL。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10%、板間變異系數(shù)小于 15%。
5. 貯藏: 2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期: 6 個(gè)月
免責(zé)聲明
1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),否則所 產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。
2. 嚴(yán)格按照說明書操作,實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作, 后果由實(shí)驗(yàn)者 承擔(dān)。
本試劑盒只能用于科學(xué)研究, 不得用于醫(yī)學(xué)診斷
更新時(shí)間:2024/5/24 11:45:35
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