大鼠線粒體呼吸鏈復合物II（complex II）試劑盒ELISA使用說明書@產(chǎn)品頻道

點擊次數(shù)：646 發(fā)布時間：2020/11/9 14:12:52

· 上傳者：上海極威生物科技有限公司

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· 資料簡介：

11月9日報道，大鼠線粒體呼吸鏈復合物II（complex II）試劑盒ELISA使用說明書@產(chǎn)品頻道介紹，本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中大鼠線粒體呼吸鏈復合物II（complex II）的含量。 l

有效期：6個月 l

保存條件：2-8℃ l

本試劑盒僅供科研使用，不得用于臨床診斷

大鼠線粒體呼吸鏈復合物II（complex II）試劑盒ELISA使用說明書@產(chǎn)品頻道，實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被大鼠線粒體呼吸鏈復合物II（complex II）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠線粒體呼吸鏈復合物II（complex II）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

大鼠線粒體呼吸鏈復合物II（complex II）試劑盒ELISA使用說明書@產(chǎn)品頻道，注意事項：

1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫 20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

2. 洗板不正確可以導致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

3. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響 OD 值。

4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍的底物液不能使用。

5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。

6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。

7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。

9. 不能使用過期產(chǎn)品。

10. 如果可能傳播疾病，所有的樣品都應管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

大鼠線粒體呼吸鏈復合物II（complex II）試劑盒ELISA使用說明書@產(chǎn)品頻道，試劑準備：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用。 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

大鼠線粒體呼吸鏈復合物II（complex II）試劑盒ELISA使用說明書@產(chǎn)品頻道，操作步驟：

1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回 4℃。

2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL；

3. 樣本孔中加入待測樣本 50μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體 100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。

5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置 1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板 5 次（也可用洗板機洗板）。

6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。

7. 每孔加入終止液 50μL，15min 內(nèi)，在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。

elisa試劑盒用戶：ELISA實驗中溫育溫度有哪幾種？

極威生物解答：溫育常采用的溫度有 43℃、37℃、室溫和4℃（冰箱溫度）等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應動力學研究時，實驗表明，兩次抗原抗體反應一般在37℃經(jīng)1-2小時，產(chǎn)物的生成可達頂峰。為加速反應，可提高反應的溫度，有些試驗在43℃進行，但不宜采用更高的溫度�？乖贵w反應4℃更為徹底，在放射免疫測定中多使反應在冰箱中過夜，以形成*多的沉淀。但因所需時間太長，在ELISA中一般不予采用。

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