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A20小鼠B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞的介紹說(shuō)明 極威生物

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Catalogue No.: C346

Product Format: a T25 flask

Culture Properties半貼壁(貼壁弱,消化時(shí)間短)

Complete Growth Medium: 89%1640+10%FBS+1%雙抗

Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

Application:  Cells and cancer research

NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

 

Components  

Item

Specifications

a T25 flask

2X106

Manual

1 copy

 

Operation steps for cell culture

1. 輕輕吹勻細(xì)胞,收集懸液1000rpm(150g左右)離心3min,棄上清;

2. 用新的完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,均勻分為幾份,接種到新的培養(yǎng)瓶中,并補(bǔ)加足量的完全培養(yǎng)基;

(細(xì)胞比較依賴(lài)細(xì)胞密度,細(xì)胞傳代前及傳代后密度不宜過(guò)低,過(guò)低可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢或者死亡。細(xì)胞傳代前培養(yǎng)基不能完全變黃,不然細(xì)胞狀態(tài)變差會(huì)導(dǎo)致傳代失敗。傳代過(guò)程吹打細(xì)胞應(yīng)盡量輕柔,不應(yīng)吹出過(guò)多氣泡。)

3. 將細(xì)胞放回37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

傳代比例: 不同細(xì)胞生長(zhǎng)速度不一,具體傳代比例視細(xì)胞生長(zhǎng)速度而定,大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代,生長(zhǎng)較慢的細(xì)胞可以1:2傳代。

Cell cryopreservation

1.凍存液:92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO(可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件自行選擇)

2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過(guò)夜后液氮保存。

Tips

1. 細(xì)胞經(jīng)過(guò)運(yùn)輸后,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正,F(xiàn)象。貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900-1000rpm(約150g)離心3min,棄上清。加5ml PBS重懸細(xì)胞,再900-1000rpm(約150g)離心3min,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)瓶。第二次PBS重懸是為了去除碎片,如果平時(shí)碎片比較少,傳代時(shí)可以省略PBS重懸的步驟;如果碎片很多,建議PBS多洗次。

2. 細(xì)胞生長(zhǎng)不均時(shí),可以將細(xì)胞消化吹散后加入新的培養(yǎng)基重新接種或傳代。

3. 細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢時(shí),可以選擇提高血清濃度培養(yǎng)(不超過(guò)20%),也可以根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),選擇傳代細(xì)胞到新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

4. 不同細(xì)胞貼壁性差異比較大,所以消化時(shí)間差別較大,20s-10min均有可能,具體以細(xì)胞消化到相互分離但未脫落,并可以輕輕吹下為準(zhǔn),嚴(yán)禁消化到細(xì)胞完全漂浮。客戶(hù)消化過(guò)度導(dǎo)致細(xì)胞死亡、漂浮、生長(zhǎng)緩慢,不提供免費(fèi)售后服務(wù)。

5. 干冰發(fā)貨均為兩支,客戶(hù)先復(fù)蘇一支,若復(fù)蘇失敗及時(shí)聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支。若客戶(hù)同時(shí)復(fù)蘇兩支均狀態(tài)不佳,我方不提供免費(fèi)售后服務(wù)。

6. 細(xì)胞狀態(tài)正常時(shí),應(yīng)盡快凍存細(xì)胞保種,凍存后應(yīng)隨機(jī)抽取一支檢測(cè)凍存效果。我方不對(duì)客戶(hù)凍存細(xì)胞導(dǎo)致死亡負(fù)責(zé),客戶(hù)凍存細(xì)胞死亡不提供免費(fèi)售后服務(wù)。

Notice

      客戶(hù)收到細(xì)胞有任何疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)致電我們,細(xì)胞收到后1周內(nèi)沒(méi)有任何電話(huà),或其他形式回訪(fǎng),默認(rèn)為細(xì)胞質(zhì)量沒(méi)問(wèn)題,之后出了任何問(wèn)題不給予免費(fèi)售后。細(xì)胞免費(fèi)售后只提供一次,若重發(fā)后再次培養(yǎng)死亡不再免費(fèi)補(bǔ)發(fā),細(xì)胞收貨時(shí)已經(jīng)死亡或密度不足的除外。



尊敬的客戶(hù):

您好!上海極威生物科技有限公司(Shanghai JIwei Biological Technology Co., Ltd.)成立于上海是一家專(zhuān)業(yè)從事“產(chǎn)品研發(fā)、市場(chǎng)銷(xiāo)售、技術(shù)服務(wù)”為一體的高科技生物技術(shù)公司。極威生物依托國(guó)內(nèi)外技術(shù)研發(fā)人才的優(yōu)勢(shì),由留美資深科學(xué)家與數(shù)位國(guó)內(nèi)多年從事生物領(lǐng)域研究的博士、碩士等高校生物領(lǐng)域研究人員共同創(chuàng)立,在科學(xué)研究和醫(yī)療檢測(cè)領(lǐng)域享有極高的聲譽(yù),經(jīng)過(guò)年的努力發(fā)展已成為專(zhuān)業(yè)供應(yīng)各類(lèi)生物科研用品的公司,長(zhǎng)期專(zhuān)注于生物領(lǐng)域,旗下產(chǎn)品種類(lèi)眾多。極威生物秉承以產(chǎn)品質(zhì)量為根本,以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向,以為客戶(hù)創(chuàng)造價(jià)值為己任的精神,致力于發(fā)展中國(guó)的科研事業(yè)。力求為我國(guó)生物科技事業(yè)提供更好的、更專(zhuān)業(yè)性的技術(shù)服務(wù)和科研產(chǎn)品自公司成立以來(lái),公司的銷(xiāo)售額保持高速增長(zhǎng),企業(yè)規(guī)模不斷擴(kuò)大,研發(fā)產(chǎn)品包括elisa試劑盒,生化試劑盒,動(dòng)物血制品,抗體,標(biāo)準(zhǔn)品,生化試劑,實(shí)驗(yàn)耗材等10萬(wàn)余種類(lèi),公司長(zhǎng)期致力于elisa試劑盒、生化試劑盒的研發(fā),為客戶(hù)提供生化試劑盒、ELISA試劑盒、技術(shù)服務(wù)等一系列實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù)。

   實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):酶聯(lián)免疫ELISA、生化測(cè)試、液相氣相檢測(cè)、Icp-MS測(cè)試、載體構(gòu)建、RACE、全基因合成、線(xiàn)粒體測(cè)序、熒光定量PCR、基因克隆、定點(diǎn)突變、染色體步移、基因組全序列獲取、環(huán)境微生物多樣性、微生物基因組測(cè)序、微生物菌種鑒定、甲基化分析服務(wù),公司本著“質(zhì)量,專(zhuān)業(yè)服務(wù)”的原則,致力于為用戶(hù)提供高性?xún)r(jià)比的試劑盒和檢測(cè)服務(wù)。 

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